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肖颖2009

铁虫 (正式写手)

[交流] 考染条带不清晰 已有2人参与

有没有遇到过表达的蛋白跑考染的胶带型很散,看不到清晰的条带。但是其他泳道的样(别人的样品)的条带都很清晰,排除了跑胶缓冲液的问题。不知道是我的蛋白本身就是这样?
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lpzl

木虫 (正式写手)

遇到过。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2013-10-29 14:50:18
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2013-10-29 14:50:18
遇到过。。。

最后分析是什么原因呢?请赐教~!
3楼2013-10-29 15:31:14
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lpzl

木虫 (正式写手)

★
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引用回帖:
3楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2013-10-29 15:31:14
最后分析是什么原因呢?请赐教~!...

看看制胶有没有问题,还有就是染色液。。。我都重新做了,还把蛋白重新表达,后来上样就有清晰的条带了。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
4楼2013-10-29 20:50:23
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同东中郎将

新虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
制样的时候尝试一下不同的Load Buffer和样品的比例看看
比如 4*Load Buffer ,可以尝试1:1, 1:2,1:3,1:4,1:5几组试试看。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
5楼2013-10-30 09:23:50
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lpzl at 2013-10-29 20:50:23
看看制胶有没有问题,还有就是染色液。。。我都重新做了,还把蛋白重新表达,后来上样就有清晰的条带了。...

哦  做胶还有缓冲液应该都没有问题。因为其他泳道的带型都很好。我估计是我的蛋白的原因。
6楼2013-10-30 09:43:18
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 同东中郎将 at 2013-10-30 09:23:50
制样的时候尝试一下不同的Load Buffer和样品的比例看看
比如 4*Load Buffer ,可以尝试1:1, 1:2,1:3,1:4,1:5几组试试看。

嗯  我们一般用2* loading buffer .其他的可以试试 。谢谢~!
7楼2013-10-30 09:44:06
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lpzl

木虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2013-10-30 09:43:18
哦  做胶还有缓冲液应该都没有问题。因为其他泳道的带型都很好。我估计是我的蛋白的原因。...

可以重新表达下蛋白看看。样品混匀后上样。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
8楼2013-10-30 13:50:53
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