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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 紫外分光光度法做标准曲线两次测得吸光度相差大原因
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yusimanyan

铁虫 (初入文坛)

[求助] 紫外分光光度法做标准曲线两次测得吸光度相差大原因

后一天做的吸光度比前一天的都大了0.3，吸光度值比较大，最大的都有2多。用的是苯酚硫酸法测金樱子多糖的含量。
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1楼 2013-10-28 11:45:07
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hehua8653

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2013-10-28 15:46:37
中药2000: 回帖置顶 2013-10-28 16:51:10
yusimanyan: 金币+2, ★有帮助 2013-12-04 09:19:09
楼主要淡定   我做了几十次的标曲  没有两次是相同的   最多只能是相关系数接近罢了  硫酸苯酚法不太稳定    你可以试着换换浓硫酸   苯酚再精制一下
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2楼2013-10-28 14:27:38
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yusimanyan

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hehua8653 at 2013-10-28 14:27:38
楼主要淡定   我做了几十次的标曲  没有两次是相同的   最多只能是相关系数接近罢了  硫酸苯酚法不太稳定    你可以试着换换浓硫酸   苯酚再精制一下

这样我算出来的含量就差很多啊，你做的也是这样吗？我在考虑要不要再做一次，就怕出来的又是另一个结果。
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3楼2013-10-28 20:19:26
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hehua8653

铁杆木虫 (正式写手)
为了让自己死心   楼主再试一次     相关系数能达到3个9就可以了
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4楼2013-10-29 07:56:07
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胡家

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yusimanyan: 金币+2, ★有帮助 2013-12-04 09:19:40
楼主，应该首先确定吸光度在最佳吸收范围，其次，对于样品的稳定性保存做到，最后仪器的测量具有一定的准确度，有可计算偏差值。
我建议楼主最少3次的标准曲线，
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路走远了，不要忘记最初的梦想。
5楼2013-10-29 08:13:23
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raulsam1984

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主，其实只要你的标准曲线的相关系数r＞0.9998，x=0时y轴截距小于x为100%时的y的值的2%，那么标曲就可以用了。其实为什么紫外的标曲每次都是先配先用，就是因为标曲每次都不一样，只要符合要求就可以了。
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6楼2013-10-29 09:14:25
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星星火燎原

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼上说的都有理，只有楼主做到标准曲线的R＞0.9998,就行。
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书山有路，贵在坚持！
7楼2013-10-29 20:03:20
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