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mmcniu

新虫 (小有名气)

[求助] 含有稀有密码子的基因想在大肠杆菌中做原核表达,Rosetta菌株

RaCC results:

Red = rare Arg codons AGG, AGA, CGA
Green = rare Leu codon CTA
Blue = rare Ile codon ATA
Orange = rare Pro codon CCC

其中含有一个CGA,Rosetta也不能解决这个问题(其他的都ok),该怎么办呢?我要放弃原核表达吗?

第一次做这方面实验,请有经验的多多帮助,谢谢!!!
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iloveecoli

铜虫 (初入文坛)


给楼主一个比较合心意的答复吧。稀有密码子只有在串联的时候才会有影响的,比如你三个都是精氨酸的稀有密码子。所以淡定,往下做吧。
12楼2014-01-26 08:49:09
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bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-10-28 12:18:38
mmcniu: 金币+1, 3x 2013-10-30 21:17:21
mmcniu: 金币+1, ★★★很有帮助, 3x 2013-10-30 21:17:56
你这个稀有密码子,也不一定完全不能表达但产量肯定很少。可以考虑同义突变,或者干脆换真核表达
岂能尽如人意,但求无愧我心
5楼2013-10-28 11:53:08
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phoenix211

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-10-29 01:13:20
mmcniu: 金币+2, ★★★很有帮助, 3x 2013-10-30 21:18:12
如果不想换系统的话  楼主试试突变给替换掉吧
6楼2013-10-28 15:13:24
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mmcniu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-10-28 11:53:08
你这个稀有密码子,也不一定完全不能表达但产量肯定很少。可以考虑同义突变,或者干脆换真核表达

谢谢!您提到的同义突变,是指设计这个位置相应的引物,用PCR把片段扩出来吗?
7楼2013-10-28 22:51:12
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