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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 含有稀有密码子的基因想在大肠杆菌中做原核表达，Rosetta菌株
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mmcniu

新虫 (小有名气)

[求助] 含有稀有密码子的基因想在大肠杆菌中做原核表达，Rosetta菌株

RaCC results:

Red = rare Arg codons AGG, AGA, CGA
Green = rare Leu codon CTA
Blue = rare Ile codon ATA
Orange = rare Pro codon CCC

其中含有一个CGA，Rosetta也不能解决这个问题（其他的都ok），该怎么办呢？我要放弃原核表达吗？

第一次做这方面实验，请有经验的多多帮助，谢谢！！！
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1楼 2013-10-27 23:04:33
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iloveecoli

铜虫 (初入文坛)
给楼主一个比较合心意的答复吧。稀有密码子只有在串联的时候才会有影响的，比如你三个都是精氨酸的稀有密码子。所以淡定，往下做吧。
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12楼2014-01-26 08:49:09
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bleach060452

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-10-28 12:18:38
mmcniu: 金币+1, 3x 2013-10-30 21:17:21
mmcniu: 金币+1, ★★★很有帮助, 3x 2013-10-30 21:17:56
你这个稀有密码子，也不一定完全不能表达但产量肯定很少。可以考虑同义突变，或者干脆换真核表达
赞一下(1人) 回复此楼
岂能尽如人意，但求无愧我心
5楼2013-10-28 11:53:08
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phoenix211

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-10-29 01:13:20
mmcniu: 金币+2, ★★★很有帮助, 3x 2013-10-30 21:18:12
如果不想换系统的话  楼主试试突变给替换掉吧
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6楼2013-10-28 15:13:24
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mmcniu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by bleach060452 at 2013-10-28 11:53:08
你这个稀有密码子，也不一定完全不能表达但产量肯定很少。可以考虑同义突变，或者干脆换真核表达

谢谢！您提到的同义突变，是指设计这个位置相应的引物，用PCR把片段扩出来吗？
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7楼2013-10-28 22:51:12
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