| 查看: 585 | 回复: 0 | ||
诺曼底1227铁杆木虫 (正式写手)
|
[求助]
immunocytochemistry实验的问题
|
|
最近在做用一些细胞的surface marker antibody来染细胞，并且通过荧光显微镜来观察这些marker的表达情况，但不知道为什么总是只能观察到DAPI染的细胞核，而看不到surface marker的表达。不过我做过flow，flow结果现实的是positive results，所以觉得可能是我实验操作的问题，所以想请教一下各位高手，能不能帮我看一下我的实验步骤有什么问题，多谢 实验基本步骤如下： 1. 用2% formalin固定30min 2. 将antigen retrieval buffer（我用的是Tris-EDTA, 10mM Tris Base, 1mM EDTA, 0.05% Tween 20, pH 9.0)煮沸，将种有细胞的slide放进去，煮大概20min； 3. 用1% BSA-PBS溶液block 1h，室温； 4. 用blocking buffer稀释的CD29一抗来和slide孵育2h, 室温； 5. 用blocking buffer稀释的含有FITC的二抗和slide孵育1h，室温； 6. 用PBS洗slide三次，每次5min； 7. 用DAPI染色 大概步骤就是上面所说的。 不知道有什么问题没有？我也问过买CD29的公司，他们的回复是说CD29可以用作ICC的，但必须要做antigen retrieval这一步。 请各位帮帮忙，多谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有216人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~
【求助】关于实验重复的问题
已经有7人回复
- 关于血浆凝固酶实验的问题
已经有14人回复
- 审稿人让补实验的问题
已经有11人回复
- 关于一个正交实验问题（L27）的请教
已经有6人回复
- 求教育：关于cck8 的一些实验问题
已经有5人回复
- RT-qPCR实验问题
已经有23人回复
- 求助！关于大鼠实验标记的问题
已经有4人回复
- 关于细胞摄取实验的问题
已经有7人回复
- 实验室做实验安全问题咨询
已经有17人回复
- 高分子物理实验问题
已经有8人回复
- 关于有机实验的问题
已经有5人回复
- 【求助】有关测细胞凋亡实验的问题
已经有4人回复
- 【讨论】有机实验重现性问题
已经有29人回复
- 如何解决实验中遇到的问题？--求方法和思路
已经有8人回复
- 【求助】大鼠足趾肿胀实验遇到问题
已经有11人回复
- 【讨论】拉伸实验问题
已经有9人回复
- 【转帖】免疫组化技术资料大全：原理、步骤、注意事项、教程及常见问题解答
已经有25人回复
- 【求助】关于MTT实验的问题请教
已经有11人回复
点击这里搜索更多相关资源科研从小木虫开始，人人为我，我为人人
30