24小时热门版块排行榜    

查看: 1976  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dewdan

新虫 (初入文坛)

[求助] 超滤管

各位虫友们,我第一次用超滤管,50KDa的,是将大肠杆菌菌体细胞破碎后离心取上清超滤,不慎离心不完全膜有点堵住了,然后膜超声清洗了接着用了。。。但是超滤完的东西跑SDS-PAGE胶看了一下膜上的蛋白全都有,50以下的也有,膜下什么蛋白都没有,这不是没起到筛分的效果吗?膜被堵了是不是就不能再用啦??
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

江正安

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-10-23 13:26:53
超滤管没有筛分的功能。截留分子量50KD,并不是说50KD以下的就会流过去。截留分子量50KD,是平均孔径,一般60KD以上的蛋白能被完全截留,但是小分子量的蛋白不一定穿过去,小分子量的蛋白会在孔上架桥,堵孔,使孔径 ...

学习了,不过超滤好像可以除盐和浓缩

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2013-10-23 23:10:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-24 00:21:36
膜被堵了再洗干净,可能会破的,虽然表面我们看不出来。建议换个新管,超滤之前最好用0.22um的滤膜过滤一下,先把其他杂质去掉。
超滤管用之前用无菌水浸泡一下再离心去掉水
你的日子如何,你的力量也必如何!
2楼2013-10-23 11:42:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

同东中郎将

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-24 00:21:42
dewdan: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-10-25 16:19:10
超滤管起不到筛分的作用。如果能起到分筛作用,纯化不是变得很简单了。
超滤管堵了,可以用0.5M NaOH 清洗一下。
曾子曰:“士不可以不弘毅,任重而道远。仁以为己任,不亦重乎?死而后已,不亦远乎?”
3楼2013-10-23 12:53:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-24 00:21:47
dewdan: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-10-29 09:40:20
超滤管没有筛分的功能。截留分子量50KD,并不是说50KD以下的就会流过去。截留分子量50KD,是平均孔径,一般60KD以上的蛋白能被完全截留,但是小分子量的蛋白不一定穿过去,小分子量的蛋白会在孔上架桥,堵孔,使孔径变小甚至完全堵住。举个例子,淘米的篓筛孔很小,但是我拿更细小的沙子装满,沙子不会全部漏出去,刚开始漏一点,后面就不漏下去了。
4楼2013-10-23 13:26:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +4 西山十月 2026-08-09 6/300 2026-08-10 00:16 by liufeng0619
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +7 Lanmanbaby 2026-08-09 14/700 2026-08-09 23:33 by Tide man
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +15 且听虎啸 2026-08-07 22/1100 2026-08-09 22:13 by 布布和一二
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
请填处理意见