应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 超滤管
71/1返回列表
查看: 2027  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

dewdan

新虫 (初入文坛)

[求助] 超滤管

各位虫友们，我第一次用超滤管，50KDa的，是将大肠杆菌菌体细胞破碎后离心取上清超滤，不慎离心不完全膜有点堵住了，然后膜超声清洗了接着用了。。。但是超滤完的东西跑SDS-PAGE胶看了一下膜上的蛋白全都有，50以下的也有，膜下什么蛋白都没有，这不是没起到筛分的效果吗？膜被堵了是不是就不能再用啦？？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢
1楼 2013-10-23 10:24:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-24 00:21:36
膜被堵了再洗干净，可能会破的，虽然表面我们看不出来。建议换个新管，超滤之前最好用0.22um的滤膜过滤一下，先把其他杂质去掉。
超滤管用之前用无菌水浸泡一下再离心去掉水
赞一下(2人) 回复此楼
你的日子如何，你的力量也必如何！
2楼2013-10-23 11:42:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

同东中郎将

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-24 00:21:42
dewdan: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-10-25 16:19:10
超滤管起不到筛分的作用。如果能起到分筛作用，纯化不是变得很简单了。
超滤管堵了，可以用0.5M NaOH 清洗一下。
赞一下 回复此楼
曾子曰：“士不可以不弘毅，任重而道远。仁以为己任，不亦重乎？死而后已，不亦远乎？”
3楼2013-10-23 12:53:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ynkuaile

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-24 00:21:47
dewdan: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-10-29 09:40:20
超滤管没有筛分的功能。截留分子量50KD，并不是说50KD以下的就会流过去。截留分子量50KD，是平均孔径，一般60KD以上的蛋白能被完全截留，但是小分子量的蛋白不一定穿过去，小分子量的蛋白会在孔上架桥，堵孔，使孔径变小甚至完全堵住。举个例子，淘米的篓筛孔很小，但是我拿更细小的沙子装满，沙子不会全部漏出去，刚开始漏一点，后面就不漏下去了。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2013-10-23 13:26:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

江正安

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ynkuaile at 2013-10-23 13:26:53
超滤管没有筛分的功能。截留分子量50KD，并不是说50KD以下的就会流过去。截留分子量50KD，是平均孔径，一般60KD以上的蛋白能被完全截留，但是小分子量的蛋白不一定穿过去，小分子量的蛋白会在孔上架桥，堵孔，使孔径 ...

学习了，不过超滤好像可以除盐和浓缩

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-23 23:10:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sxxuan

金虫 (著名写手)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-25 13:37:31
引用回帖:
5楼: Originally posted by 江正安 at 2013-10-23 23:10:20
学习了，不过超滤好像可以除盐和浓缩
...

同意，所以超滤的作用一般只用于快速除盐和浓缩，但如果蛋白浓度太高了，蛋白可能会沉淀，同样会堵住。
一般建议选用1/3孔径大小，例如目的蛋白是100k，就选用30k左右截流量的超滤管，那么就能留住100k的蛋白，否则可能有漏蛋白的情况
哈哈，上述都是从木虫上看到的知识呀
赞一下 回复此楼
你的日子如何，你的力量也必如何！
6楼2013-10-25 09:15:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dewdan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 同东中郎将 at 2013-10-23 12:53:14
超滤管起不到筛分的作用。如果能起到分筛作用，纯化不是变得很简单了。
超滤管堵了，可以用0.5M NaOH 清洗一下。

原来如此~长见识了~谢谢~
赞一下 回复此楼
7楼2013-10-25 16:18:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 dewdan 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 3/150 2026-08-30 02:29 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 01:58 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 01:36 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 01:14 by ZPa0EcMwuECS
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 01:14 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-30 00:53 by ZPa0EcMwuECS
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 00:52 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 00:41 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +9 苏东坡二世 2026-08-23 9/450 2026-08-29 14:41 by hustersqt
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭