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z372818207

金虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖胶每次拍照都出现斜条纹

琼脂糖电泳完去拍照，每次拍完都是这样，照片中出现斜条纹。凝胶成像系统没有问题，因为别人拍的没有这种现象，分析不出原因。请各位大侠帮忙解决~~~~
琼脂糖胶每次拍照都出现斜条纹
图片2.jpg
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做好自己
1楼 2013-10-22 20:27:09
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

素手就琴

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-27 02:01:05
我感觉像是凝胶成像系统的问题。不过你说同样的仪器，别人拍的没有这种现象。那你借别的实验室的用一下试试？或者请别人帮你跑一次。因为以前我们成像系统上面那个紫外灯有问题，照出来 一半是正常背景，另一半就跟曝光过度似的泛白，跟你图中的条纹颜色很像
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人生多烦忧，不如一吊解千愁~
7楼2013-10-26 08:36:41
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普通回帖

牧炀

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-10-22 22:57:11
是EB没染好还是你制胶时加EB没混匀
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2楼2013-10-22 21:20:26
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z372818207

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 牧炀 at 2013-10-22 21:20:26
是EB没染好还是你制胶时加EB没混匀

染色是属于后染法，染色大概7min，洗涤大概3min，这个对其影响大吗？
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做好自己
3楼2013-10-22 21:47:32
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白杨柳

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-26 03:29:31
你的带都能跑出来而且不是斜的，说明不是电泳的问题；斜线看起来不是从点样孔开始的，而是从凝胶的最前沿开始的，说明也不应该是点样的问题。最大可能就是你在制胶的时候有污染，如果做了几次都这样的话，那就是制胶板有问题，每次都污染胶。用其他实验室的做一次呗
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前进吧
4楼2013-10-25 17:39:14
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z372818207

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 白杨柳 at 2013-10-25 17:39:14
你的带都能跑出来而且不是斜的，说明不是电泳的问题；斜线看起来不是从点样孔开始的，而是从凝胶的最前沿开始的，说明也不应该是点样的问题。最大可能就是你在制胶的时候有污染，如果做了几次都这样的话，那就是制胶 ...

试了用其他核酸染料染色不会出现这种情况，只用EB才会~求解释啊，而且别人用这EB没任何问题。几天了还找不出答案，虽然可以用其他染料替代，但还是觉得EB的效果最好。
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做好自己
5楼2013-10-25 22:26:47
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黑盖儿

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-27 02:00:54
总感觉你这胶好像很硬的样子，建议你重新配琼脂糖凝胶，还要就是不要用后染色了，在溶胶之前加入EB，还有你的TAE缓冲液是不是有一段时间没换了？也许换一下缓冲液会好一些。希望对你有帮助。
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我给不了你宝马香车，锦衣玉食，但我会用一辈子去疼你，爱你，保护你
6楼2013-10-26 08:28:44
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白杨柳

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-10-27 02:01:12
引用回帖:
5楼: Originally posted by z372818207 at 2013-10-25 22:26:47
试了用其他核酸染料染色不会出现这种情况，只用EB才会~求解释啊，而且别人用这EB没任何问题。几天了还找不出答案，虽然可以用其他染料替代，但还是觉得EB的效果最好。...

还是建议去别的实验室换一下跑胶的设备，别人用EB没问题，说明不是EB的问题啊，从自己单独的那部分实验过程找起，共用的估计没什么问题
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前进吧
8楼2013-10-26 13:34:40
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！欢迎常回来看看 2013-10-27 02:01:35
把你的样品交给别人做一次吧，不要想着找到原因，有太多不确定性了，假如下一次还出现这个情况，那才值得探究原因并改进。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
9楼2013-10-27 00:49:52
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 素手就琴 at 2013-10-26 08:36:41
我感觉像是凝胶成像系统的问题。不过你说同样的仪器，别人拍的没有这种现象。那你借别的实验室的用一下试试？或者请别人帮你跑一次。因为以前我们成像系统上面那个紫外灯有问题，照出来 一半是正常背景，另一半就 ...

同感。我感觉是不是他的成像系统的灯管的投射影子啊。
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应助之星就是我~没错。你没有看错~
10楼2013-10-27 11:21:40
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