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kehan777木虫 (小有名气)
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转化后涂布，阴性对照培养皿上长有一两个菌落，能否继续在阳性平皿上挑单克隆？
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转化后涂布（已加抗生素），阴性对照培养皿上长有一两个菌落，能否在阳性对照的平板上挑取单克隆，进行后续的实验（摇菌、保种、提质粒、酶切鉴定。。。） 问题：阴性对照是不应该长菌的，就算是一两个，但是它确实长了，性质上说是染菌了，那么阳性对照的实验能否继续？为什么？ 如果可以的话，阴性对照上有一个两染菌影响不大，那再多几个呢？是按比例来算阳性平皿染菌的概率吗？ 阴性平皿上染有几个菌的可能原因有什么？ （ 空气中的菌能存活？感受态细胞本身有污染？抗生素死活？.....(涂布棒是没有问题的）有什么办法可以避免？ |
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cicelyzh
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kehan777: 金币+10, ★有帮助, 基本上是这样子，但没有对我的问题进行针对性回答 2013-10-22 19:12:25
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| 阴性平板上长几个克隆一般的原因是抗性板是筛选压力稍有不足。出现这种情况的原因可能是抗生素母液部分失效或者到平板时加抗生素时培养基的温度过高。你可以用新鲜的抗生素母液重新配置抗性板，如果还出现这种情况，还有可能是感受态细胞的问题。如果阳性实验平板上长的克隆比较多，可以继续挑单克隆摇菌做进一步验证。如果样品实验板上长的克隆也很少，可能是实验本身出了问题。 |
2楼2013-10-21 00:26:38
gaojuan1985
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kehan777
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