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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 一直提不出棉花的总RNA，要崩溃了
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郑顺利

金虫 (正式写手)

[求助] 一直提不出棉花的总RNA，要崩溃了

这段时间一直在提棉花的RNA,试过CTAB法，SDS法，TransZol法等多种方法，把用的所有东西都重新处理过，可是就是没有提出来过，结果要么只有DNA，要么只有降解了的RNA，要么什么都没有，真的不知道该怎么办了
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努力过才不会留太多的遗憾
1楼 2013-10-16 12:06:53
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

郑顺利

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by lmcyjxs at 2013-10-18 10:46:29
我最近也在提取木本植物的成熟叶片RNA，也试过很多试剂盒及方法，包括OMEGA试剂盒、天根试剂盒、天净沙试剂盒，CTAB法、CTAB-LiCL法、异硫氰酸胍法，都不行，提取的只有一条5S条带，要么就两条带，其中28S和18S混成 ...

:hand我是从棉花叶片和根系中提取。请问你是怎么改善褐化现象的呢？你现在是用什么方法提的？降解严重吗？
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努力过才不会留太多的遗憾
14楼2013-10-19 09:53:05
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普通回帖

867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece
买个试剂盒去提，超快的1
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有些东西因为得不到而变得美好，有些东西因为拥有而变得弥足珍贵！
2楼2013-10-16 13:39:48
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郑顺利

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 867575969 at 2013-10-16 13:39:48
买个试剂盒去提，超快的1

哪一种试剂盒？我用过全式金的试剂盒，但是也没提出来。
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努力过才不会留太多的遗憾
3楼2013-10-16 14:20:59
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-16 18:37:20
从什么样的棉花里提？ 不会是已经采摘了干燥后的吧。我虽然是外行，但是感觉应该去从“没开花”（外行不知道怎么表达）的时候去取样并立即提取哇。
另外，推荐Qiagen的总RNA提取试剂盒。
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4楼2013-10-16 18:07:27
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郑顺利

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gaoyang636 at 2013-10-16 18:07:27
从什么样的棉花里提？ 不会是已经采摘了干燥后的吧。我虽然是外行，但是感觉应该去从“没开花”（外行不知道怎么表达）的时候去取样并立即提取哇。
另外，推荐Qiagen的总RNA提取试剂盒。

试过Qiagen的试剂盒，也不行......
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努力过才不会留太多的遗憾
5楼2013-10-17 08:18:06
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植物园园长

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
天根的多糖多酚RNA试剂盒很好用，棉花所的客户用的很多，建议试试！
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在路上～～Marketing!
6楼2013-10-17 15:00:50
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416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
植物比较难提，建议用sigma的试剂盒
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做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
7楼2013-10-17 18:07:11
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天王黑曼巴

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
提rna时要注意RNA水解酶，所用的仪器都要用DEPC水处理，注意带手套口罩，你的不是被分解了吧
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8楼2013-10-17 21:46:20
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郑顺利

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 植物园园长 at 2013-10-17 15:00:50
天根的多糖多酚RNA试剂盒很好用，棉花所的客户用的很多，建议试试！

谢谢，我再试试。
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努力过才不会留太多的遗憾
9楼2013-10-18 08:49:14
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郑顺利

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 天王黑曼巴 at 2013-10-17 21:46:20
提rna时要注意RNA水解酶，所用的仪器都要用DEPC水处理，注意带手套口罩，你的不是被分解了吧

我觉得我的要么是在第一步就降解了、要么是根本就没提取出来，因为用有机溶剂抽提时根本就没有中间层。
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努力过才不会留太多的遗憾
10楼2013-10-18 08:51:26
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