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郑顺利

金虫 (正式写手)

[求助] 一直提不出棉花的总RNA,要崩溃了

这段时间一直在提棉花的RNA,试过CTAB法,SDS法,TransZol法等多种方法,把用的所有东西都重新处理过,可是就是没有提出来过,结果要么只有DNA,要么只有降解了的RNA,要么什么都没有,真的不知道该怎么办了
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努力过才不会留太多的遗憾
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lmcyjxs

金虫 (正式写手)

我最近也在提取木本植物的成熟叶片RNA,也试过很多试剂盒及方法,包括OMEGA试剂盒、天根试剂盒、天净沙试剂盒,CTAB法、CTAB-LiCL法、异硫氰酸胍法,都不行,提取的只有一条5S条带,要么就两条带,其中28S和18S混成一个条带,5S处一条带。也在头痛中,不过请问你的棉花是什么部位?花吗?采样有无问题?采样要新鲜,研磨要充分、裂解要充分,这些都做到了,那么该是内源性酶和杂质太多了,需要有针对性的措施。我之前提取的沉淀一直有褐化现象,后来终于改善了,但是还是降解的,呈弥散状态,还在继续改进中。。。。。。。望多多交流啊
思路决定出路。。。
12楼2013-10-18 10:46:29
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867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece

买个试剂盒去提,超快的1
有些东西因为得不到而变得美好,有些东西因为拥有而变得弥足珍贵!
2楼2013-10-16 13:39:48
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郑顺利

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 867575969 at 2013-10-16 13:39:48
买个试剂盒去提,超快的1

哪一种试剂盒?我用过全式金的试剂盒,但是也没提出来。
努力过才不会留太多的遗憾
3楼2013-10-16 14:20:59
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gaoyang636

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-10-16 18:37:20
从什么样的棉花里提? 不会是已经采摘了干燥后的吧。我虽然是外行,但是感觉应该去从“没开花”(外行不知道怎么表达)的时候去取样并立即提取哇。
另外,推荐Qiagen的总RNA提取试剂盒。
4楼2013-10-16 18:07:27
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