应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有没有人验证过这篇文章的数据
51/1返回列表
查看: 1391  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

遨游生命

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 有没有人验证过这篇文章的数据 已有3人参与

小虫在做实验时，查到了中科大田志刚教授在PNAS上的一篇文章，刚好有小鼠TLR3和TLR4这两个基因的引物，于是直接参考来用。结果这两个基因的引物都不好用，TLR4直接扩增不出来，TLR3明显具有非特性扩增。不知道有没有虫友也参考过这篇文章的引物序列做过这两个基因的扩增？或许是我的实验条件不合适？但是我用的是温度梯度检测，TLR3在几个温度下有明显非特异性扩增，此外的温度范围下没有特异性扩增。请各位虫友赐教，小虫不胜感激啊原文链接地址http://www.pnas.org/content/102/47/17077.full.pdf+html
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-10-15 09:15:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

遨游生命

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-10-16 15:58:15
1.LZ做PCR之前即使用文献的引物也要先做blast和primer打分，即使是高水平文献引物写错的概率也是很高的。
2.PCR条件的摸索是比较闹心的，耐心的反复做，试试加DMSO，甘油之类的。
3.模板质量如何？PCR条件再好，模 ...

出这两个基因为还有内参基因一个引物。这个内参基因的引物扩增的特异性很好。不知道为什么差别很大
赞一下 回复此楼
5楼2013-10-16 17:13:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

DAX1

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-16 09:11:06
楼主，要找到和你一样参考的概率应该极小哦。不知道你是做克隆还是半定量。换个酶试试，话说我这么多年做了大大小小克隆不下50个基因，从来没用过温度梯度检测，一直坚持用kod和phusion这两个酶。实在不行就发信问问他们具体实验操作呗，一般都会给回的。
Ps，八年前上过老田的免疫课，还是很不错的。
赞一下 回复此楼
2楼2013-10-16 04:20:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

elbo

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
直接联系作者，请教一下。
赞一下 回复此楼
3楼2013-10-16 15:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hl16010921

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-10-16 19:32:02
1.LZ做PCR之前即使用文献的引物也要先做blast和primer打分，即使是高水平文献引物写错的概率也是很高的。
2.PCR条件的摸索是比较闹心的，耐心的反复做，试试加DMSO，甘油之类的。
3.模板质量如何？PCR条件再好，模板差也不行呀。
赞一下 回复此楼
4楼2013-10-16 15:58:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 5/250 2026-08-08 21:54 by 13586093586
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +3 布布和一二 2026-08-08 3/150 2026-08-08 18:15 by Lightingo
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 4/200 2026-08-08 17:19 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 17:02 by oEVWOejN9taj
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:47 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 5/250 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:02 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 WQyTGMbfH7Cx 2026-08-07 4/200 2026-08-08 15:02 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 6/300 2026-08-08 14:01 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭