19楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-10-18 16:50:54
我表示赞同斑竹。我们都是做了cdna后，稀释1倍作为模板的。也就是说假设逆转录是20μl体系，要稀释成40μl之后取1微升为模板。您这个量实在是太多了...

21楼: Originally posted by 963979587 at 2013-10-22 11:35:28
嗯，是挺多的，就是想知道会不会有什么负作用？...

22楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-10-22 14:44:06
大概会影响效率吧，你可以看看你的扩增效率。模板浓度太高不好的，有可能扩不出来。...

18楼: Originally posted by taccycle at 2013-10-17 11:25:18
RNA电泳的话要用1%的胶和那个2000的Marker，如果没有电泳条带就说明你的RNA浓度有点低，那你反转录的时候可以多用点RNA，同时相应减少体系中水的用量。1%的胶不适合用来检测短片段，你至少配制个2%的胶，这样用200 ...

2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-10-14 22:31:01
你的模板用量不是一般的大。通常情况下是用1μg RNA反转录后稀释5倍后取1μl做模板。把熔解曲线图发上来看看。CT值是多少？是否在15-30之间？