24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 7927  |  回复: 24

963979587

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-10-18 16:50:54
我表示赞同斑竹。我们都是做了cdna后,稀释1倍作为模板的。也就是说假设逆转录是20μl体系,要稀释成40μl之后取1微升为模板。您这个量实在是太多了...

嗯,是挺多的,就是想知道会不会有什么负作用?
21楼2013-10-22 11:35:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙门小rna

金虫 (正式写手)

引用回帖:
21楼: Originally posted by 963979587 at 2013-10-22 11:35:28
嗯,是挺多的,就是想知道会不会有什么负作用?...

大概会影响效率吧,你可以看看你的扩增效率。模板浓度太高不好的,有可能扩不出来。
应助之星就是我~没错。你没有看错~
22楼2013-10-22 14:44:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

963979587

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
22楼: Originally posted by 沙门小rna at 2013-10-22 14:44:06
大概会影响效率吧,你可以看看你的扩增效率。模板浓度太高不好的,有可能扩不出来。...

怎么看扩增效率啊?我也觉得模板量多了不好,第二天再重复做的效果就差好多?
23楼2013-10-22 21:37:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

963979587

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
18楼: Originally posted by taccycle at 2013-10-17 11:25:18
RNA电泳的话要用1%的胶和那个2000的Marker,如果没有电泳条带就说明你的RNA浓度有点低,那你反转录的时候可以多用点RNA,同时相应减少体系中水的用量。1%的胶不适合用来检测短片段,你至少配制个2%的胶,这样用200 ...

1%的不行吗?不是都用1%的胶做rna电泳吗?
我做DNA电泳连mark都跑不出来,也没觉得出什么问题啊?
24楼2013-10-22 21:40:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

华中农业大学

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-10-14 22:31:01
你的模板用量不是一般的大。通常情况下是用1μg RNA反转录后稀释5倍后取1μl做模板。把熔解曲线图发上来看看。CT值是多少?是否在15-30之间?

你好,我也是用的1ug做的反转录,后面稀释的是50倍,跑内参时CT值很高,在30左右,这样行吗?
华中农业大学爱我
25楼2016-03-22 13:39:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 963979587 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 河北省自然科学基金 +5 Peterchao 2026-05-18 5/250 2026-05-21 22:08 by zhang5657
[基金申请] 今年审到国自然15份,谈谈感受 +23 国自然国社科中 2026-05-17 24/1200 2026-05-21 20:51 by pinyuan33
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +4 希冀,有书读 2026-05-20 6/300 2026-05-21 15:09 by 982564
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[论文投稿] Sci. Bull. 悲剧经验 +7 jyang1999 2026-05-16 8/400 2026-05-21 08:50 by 能丫
[论文投稿] 投MDPI的三个期刊都被桌拒 +3 木虫研究牲 2026-05-17 4/200 2026-05-21 08:02 by bobvan
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 6/300 2026-05-21 01:37 by 17520222914
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[有机交流] 如何实现卤原子转化 +3 BT20230424 2026-05-15 8/400 2026-05-20 09:32 by xtlilibin
[考博] 找博士生导师 +6 小代想上岸 2026-05-15 7/350 2026-05-19 10:22 by free_fisher
[考博] 26/27申博自荐-锂/钠电池方向 5+3 狗头军师. 2026-05-15 4/200 2026-05-19 09:10 by moonboat
[考博] 2026博士还有哪些学校有名额 +7 小王求读研 2026-05-15 8/400 2026-05-19 08:27 by zhyzzh
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
[考博] 光量子物理方向 博士招生 1人(2026.09) +3 sandyworld 2026-05-15 4/200 2026-05-17 14:38 by sandyworld
信息提示
请填处理意见