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wfmfj

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 浅歌99 at 2013-10-28 08:58:25
其实已经重新提过细胞核，但是出现了相同的问题。我用的是蛋白酶K处理48小时，中间更换一次裂解液，有没有可能是蛋白酶处理不够啊？...

不会的，其实一般的材料处理24-48小时就足够了。你用的材料是什么？取的是什么组织？
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扣鼻屎的姿势很帅
11楼2013-10-28 14:22:19
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wfmfj

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 浅歌99 at 2013-10-28 09:00:40
能不能把你提细胞核的参考方法发我一份，我参考的是罗美中和Rod.A.Wing的文章。非常感谢...

你在网上搜一下张洪斌的文献，上面很详细。发表在NATURE protocol上的。
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扣鼻屎的姿势很帅
12楼2013-10-28 14:23:47
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浅歌99

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by wfmfj at 2013-10-28 14:22:19
不会的，其实一般的材料处理24-48小时就足够了。你用的材料是什么？取的是什么组织？...

用的是芒草的叶片。实在不知道问题出在哪一步，很头疼。
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13楼2013-10-28 16:10:19
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浅歌99

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
12楼: Originally posted by wfmfj at 2013-10-28 14:23:47
你在网上搜一下张洪斌的文献，上面很详细。发表在NATURE protocol上的。...

是“Construction and screening of BAC libraries made from Brachypodium genomic DNA”么
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14楼2013-10-28 16:47:49
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wfmfj

金虫 (初入文坛)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-30 22:14:33
引用回帖:
14楼: Originally posted by 浅歌99 at 2013-10-28 16:47:49
是“Construction and screening of BAC libraries made from Brachypodium genomic DNA”么...

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扣鼻屎的姿势很帅
15楼2013-10-29 12:23:49
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浅歌99

新虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by wfmfj at 2013-10-25 18:44:44
胶块可以通过脉冲电泳跑1%低熔点琼脂糖胶回收1M以上的片段再进行后续操作。这样可以去除大部分杂质，只用原来1/10的酶量基本就可以切动，但是不能保证能成功，因为大片段DNA片段里面的杂质成分其实很复杂的，你可以 ...

试过了  先用低熔点琼脂糖回收可以切动。 非常感谢！！
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16楼2013-10-30 09:52:29
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wfmfj

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 浅歌99 at 2013-10-30 09:52:29
试过了  先用低熔点琼脂糖回收可以切动。 非常感谢！！...

祝你好运！
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扣鼻屎的姿势很帅
17楼2013-10-30 20:18:02
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gyesang

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引用回帖:
10楼: Originally posted by 浅歌99 at 2013-10-28 09:00:40
能不能把你提细胞核的参考方法发我一份，我参考的是罗美中和Rod.A.Wing的文章。非常感谢...

http://www.nature.com/nprot/jour ... nprot.2011.455.html

nature protocol的文章
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
18楼2013-10-30 22:13:39
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浅歌99

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
18楼: Originally posted by gyesang at 2013-10-30 22:13:39
http://www.nature.com/nprot/journal/v7/n3/full/nprot.2011.455.html

nature protocol的文章...

非常感谢
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19楼2013-11-04 16:25:41
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juwanyiruo

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 浅歌99 at 2013-10-28 08:58:25
其实已经重新提过细胞核，但是出现了相同的问题。我用的是蛋白酶K处理48小时，中间更换一次裂解液，有没有可能是蛋白酶处理不够啊？...

我也在酶切出了问题，做了好多次都没有好的结果，你后来做出来了么？望告之，不胜感激啊！！
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20楼2014-03-05 16:42:33
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