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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 波谱分析 » 关于荧光激发发射光谱的一个问题
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小木棉要努力

木虫 (正式写手)

[求助] 关于荧光激发发射光谱的一个问题

请问大家：
       荧光激发光谱和发射光谱的纵坐标都是荧光强度，荧光只有在电子返回到基态的过程中才会产生，所以这两种光谱反映的都该是电子从第一激发单重态的最低能级到基态各个振动能级的情况，而定义中说激发光谱能表明分子第一激发态各振动能级的结构，这是怎么体现的呢？本人刚接触光谱分析，可能问题比较幼稚，请大家赐教，谢谢！
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1楼 2013-10-05 23:53:21
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huahua33

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
suruiqin: 金币+1, 鼓励交流，欢迎常来分析版~ 2013-10-06 10:58:33
激发谱中的各个激发峰都对应基态到特定能级的跃迁，要知道是哪个能级根据激发峰的位置就可以知道能量差。

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2楼2013-10-06 00:48:55
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mayanshun

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
suruiqin: 金币+1, 鼓励交流，欢迎常来分析版~ 2013-10-06 10:58:50
小木棉要努力: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2013-10-08 09:17:58
荧光分析中，发射光谱和激发光谱是两个不同的概念。激发光谱反映的不同的激发光（不同的照射波长）使基态分子到达激发态然后再回到基态（使用特定发射波长来检测）的情况；发射光谱是反映基态分子在特定激发波长照射（通常使用最大激发波长，因为此处有最多的分子能到达激发态）后先通过振动弛豫、内转换等形式回到第一激发态最低振动能级，然后从此状态回到基态的各种振动能级，以发光的形式释放能量。激发光谱和吸收光谱相关，某波长有最大吸收，则激发光谱中此处就会有最大发射强度。简而言之，激发光谱反映的是基态分子在不同波长处被激发到激发态的概率；发射光谱反映的是激发态分子到达第一激发态最低振动能级后回到基态各种振动能级的概率。
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3楼2013-10-06 10:46:05
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小木棉要努力

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mayanshun at 2013-10-06 10:46:05
荧光分析中，发射光谱和激发光谱是两个不同的概念。激发光谱反映的不同的激发光（不同的照射波长）使基态分子到达激发态然后再回到基态（使用特定发射波长来检测）的情况；发射光谱是反映基态分子在特定激发波长照射 ...

谢谢您详细的解答，我差不多已经懂了，但还有一个疑问：发射光谱的形状只跟基态的振动能级分布有关，那么，增大或减小激发波长的大小，虽然不能改变发射光谱的波形，但是不是能改变在某一荧光波长下荧光强度的大小呢？即改变发射光谱的纵坐标呢？
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4楼2013-10-07 00:23:24
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mayanshun

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

谢谢您详细的解答，我差不多已经懂了，但还有一个疑问：发射光谱的形状只跟基态的振动能级分布有关，那么，增大或减小激发波长的大小，虽然不能改变发射光谱的波形，但是不是能改变在某一荧光波长下荧光强度的大小呢？即改变发射光谱的纵坐标呢？

改变激发波长，就会改变到达激发态分子的数目，从而会改变发射光谱的波长，在最大激发波长处，发射光谱各种波长处有相应的最高的发射强度，但波形不会变化。因为从第一激发单重态的最低振动能级回到基态各种振动能级的概率没有改变。
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5楼2013-10-07 09:03:12
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hq天天开心

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小木棉要努力 at 2013-10-07 00:23:24
谢谢您详细的解答，我差不多已经懂了，但还有一个疑问：发射光谱的形状只跟基态的振动能级分布有关，那么，增大或减小激发波长的大小，虽然不能改变发射光谱的波形，但是不是能改变在某一荧光波长下荧光强度的大小 ...

波普是不会改变的,只在特定波长处有特征吸收

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开心就笑，不开心就过会儿再笑
6楼2013-10-07 13:40:41
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小木棉要努力

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mayanshun at 2013-10-07 09:03:12
谢谢您详细的解答，我差不多已经懂了，但还有一个疑问：发射光谱的形状只跟基态的振动能级分布有关，那么，增大或减小激发波长的大小，虽然不能改变发射光谱的波形，但是不是能改变在某一荧光波长下荧光强度的大小呢 ...

不好意思再问一下，您说的改变到达激发态分子的数目，从而会改变发射光谱的波长，对这句话的理解可不可以这样：比如说到达激发态的分子数变多了，那么回落到基态的分子数也会变多，能发射出更强的荧光，所以发射波长会蓝移？
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7楼2013-10-07 21:20:59
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小木棉要努力

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mayanshun at 2013-10-06 10:46:05
荧光分析中，发射光谱和激发光谱是两个不同的概念。激发光谱反映的不同的激发光（不同的照射波长）使基态分子到达激发态然后再回到基态（使用特定发射波长来检测）的情况；发射光谱是反映基态分子在特定激发波长照射 ...

另外我还想问下，我的实验是利用EEMs，选定的激发波长是：250~450 nm；发射波长是：300~600 nm。这种方法是不是不同于传统的先扫吸收光谱，再扫发射光谱再扫激发光谱这样选定激发、发射波长呢？而是凭经验值直接设定参数，然后从三维立体图中寻找特征立体峰来做判断？
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8楼2013-10-08 09:21:11
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mayanshun

金虫 (小有名气)
“不好意思再问一下，您说的改变到达激发态分子的数目，从而会改变发射光谱的波长，对这句话的理解可不可以这样：比如说到达激发态的分子数变多了，那么回落到基态的分子数也会变多，能发射出更强的荧光，所以发射波长会蓝移？”
   需要修正：改变激发波长，会改变到达激发态的数目。但发射光谱的各波长不会变化。  在最大激发波长处，最多的分子到达激发态，但所有的激发态分子都通过振动弛豫等非辐射形式先回到第一激发单重态的最低振动能级，然后在发射不同波长的荧光回到基态的各种振动能级（从而产生发射光谱，存在最大发射波长是因为对应的概率最大）。      强度变化和波长变化是不同的概念。
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9楼2013-10-08 19:13:33
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很冷

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mayanshun at 2013-10-06 10:46:05
荧光分析中，发射光谱和激发光谱是两个不同的概念。激发光谱反映的不同的激发光（不同的照射波长）使基态分子到达激发态然后再回到基态（使用特定发射波长来检测）的情况；发射光谱是反映基态分子在特定激发波长照射 ...

请教一下，其他条件相同的情况下，使用最大激发波长和使用非最大激发波长时，其所测得的荧光强度值一样吗？
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10楼2016-01-13 16:34:23
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