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请教140KD蛋白的转膜条件
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| 请教各位前辈，最近在做 TLR7140kd的蛋白，试过的转膜条件有恒压100v（电流在236ma左右）,转2小时；横流300ma(电压在135v左右)2小时，转完膜后用丽春红染膜，可以看到170kd的蛋白条带，用的是（10-170kd）的Marker，但显影的时候我的目的条带没有出现，用的一抗是CST的推荐浓度1：1000,1:800，均试过，二抗1:5000，1:8000，1:9000,1：10000，140kd的条带始终没有出现，170kd的条带却压出来了，虽然条带很细，而且背景也很深请问各位前辈我的转膜条件有问题吗？还是需要提高一抗浓度？应该如何改进，请各位前辈不吝赐教，谢谢，急急急！ |
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麻烦请教一下TLR7（分子量140）的表达很低吗请问您做过相关研究？请指教~上样量40微克，一抗试了推荐浓度1:1000，1:800,1:600都没有在分子量140的位置压出条带，但在170的位置能压出很细的条带，若是170的位置能压出条带是不是说明我的转膜没有问题，但不知为什么140的位置压不出条带很是费解，请您多多指教~ |
feilinshiji12楼2013-10-07 13:49:19
2楼2013-10-06 00:24:31
ljsh
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