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crystalwby

铜虫 (小有名气)

[求助] 纳米金标记DNA然后退火使聚集的问题

我是用TCEP法标记纳米金的,纳米金不是自己合成的是在Sigma上面买的,10nm。
之前标记DNA之后通过退火就可以使DNA杂交促使纳米金聚集----很经典的。 我的反应体系环境就是25mM Tris,200mM NaCl。

后来第一瓶纳米金用完了,在Sigma上面又买了一瓶新的,再标记之后用同样的条件退火,纳米金就再不能很快聚集了。
增大NaCl的浓度,从200mM增大到400mM,可以看到杂交情况是越来越好的,虽然都没有达到整个液体颜色不红。但是只要到500mM,就是纳米金本身的不可逆聚集了。合适的盐浓度怎么都调不好!

第一瓶纳米金标记了DNA的还剩了一些,最初在25mM Tris,200mM NaCl条件下是可以顺利聚集的,我有半个月没有做实验,半个月后再用那些原本可以聚集的,退火之后发现也不能聚集了!!这是什么原因啊。。。 我把我反应的Tris buffer和NaCl都重新配了还是不能聚集!!

纳米金会变吗???
有没有虫友能帮我解答一下,我在补实验,好急。实验都重复不出来了!

[ Last edited by crystalwby on 2013-10-5 at 13:58 ]
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念去去001

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by crystalwby at 2013-10-06 18:23:38
求回复啊!!求帮忙!!!

楼主问题解决没?我也遇到了类似的问题
7楼2017-06-04 22:58:18
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crystalwby

铜虫 (小有名气)

求回复啊!!求帮忙!!!
2楼2013-10-06 18:23:38
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crystalwby

铜虫 (小有名气)

。。。。。。
3楼2013-10-07 15:43:23
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648582818

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
crystalwby: 金币+15, ★★★★★最佳答案, 经过本人苦思冥想,终于找到bug所在。^_^ 2013-10-07 20:20:04
淡定。。找实验条件吧。。。环境温度什么的。

或者重新再做~~~~话说第一瓶可重复么= =。。。
4楼2013-10-07 16:27:07
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