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crystalwby铜虫 (小有名气)
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纳米金标记DNA然后退火使聚集的问题
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我是用TCEP法标记纳米金的，纳米金不是自己合成的是在Sigma上面买的，10nm。 之前标记DNA之后通过退火就可以使DNA杂交促使纳米金聚集----很经典的。 我的反应体系环境就是25mM Tris，200mM NaCl。 后来第一瓶纳米金用完了，在Sigma上面又买了一瓶新的，再标记之后用同样的条件退火，纳米金就再不能很快聚集了。 增大NaCl的浓度，从200mM增大到400mM，可以看到杂交情况是越来越好的，虽然都没有达到整个液体颜色不红。但是只要到500mM，就是纳米金本身的不可逆聚集了。合适的盐浓度怎么都调不好！ 第一瓶纳米金标记了DNA的还剩了一些，最初在25mM Tris，200mM NaCl条件下是可以顺利聚集的，我有半个月没有做实验，半个月后再用那些原本可以聚集的，退火之后发现也不能聚集了！！这是什么原因啊。。。 我把我反应的Tris buffer和NaCl都重新配了还是不能聚集！！ 纳米金会变吗？？？ 有没有虫友能帮我解答一下，我在补实验，好急。实验都重复不出来了！ [ Last edited by crystalwby on 2013-10-5 at 13:58 ] |
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