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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 多肽固相合成时用什么震荡设备？
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xinhuang

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 多肽固相合成时用什么震荡设备？

我用固相合成管做多肽合成，固相CPG和液体反应，哪位知道用什么仪器震荡啊？
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1楼 2013-09-29 11:24:41
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-09-29 13:03:06
xinhuang: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-09-29 14:08:35
摇床就可以。量大可以机械搅拌，更高级的搅拌加通氮气。但常用的还是摇床。
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2楼2013-09-29 11:48:09
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xinhuang

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-29 11:48:09
摇床就可以。量大可以机械搅拌，更高级的搅拌加通氮气。但常用的还是摇床。

1g左右算不算量大呢？磁子搅拌会不会使CPG表面破裂啊，做失败了一次，没有找到原因，
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3楼2013-09-29 14:10:27
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
xinhuang: 金币+3, ★★★★★最佳答案 2013-09-29 14:47:56
1g量很小，固相合成管是什么东东？玻璃管一端砂芯加活塞，另一端塞子？lz用的不会是自己合成的树脂吧。
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4楼2013-09-29 14:25:41
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xinhuang

铁杆木虫 (著名写手)
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4楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-29 14:25:41
1g量很小，固相合成管是什么东东？玻璃管一端砂芯加活塞，另一端塞子？lz用的不会是自己合成的树脂吧。

是买的CPG，但要自己再修饰一下。固相合成管，就是反应管，底端带砂芯可以过滤。上次用玻璃烧瓶，磁子搅拌没有做成功，目前在找工艺的原因。
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5楼2013-09-29 14:30:34
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hl16010921

木虫 (正式写手)
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5楼: Originally posted by xinhuang at 2013-09-29 14:30:34
是买的CPG，但要自己再修饰一下。固相合成管，就是反应管，底端带砂芯可以过滤。上次用玻璃烧瓶，磁子搅拌没有做成功，目前在找工艺的原因。...

用管子方便些。玻璃瓶加转子大量还行（几百g），少量树脂损失太大。反应器一定要好好硅烷化。摇床转速120rpm左右，室温。fmoc固相法一般没问题的。但如果lz用的不是商业化的树脂（王树脂，renk树脂，二氯三苯甲基树脂等）可能机械强度会差些。
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6楼2013-09-29 14:40:10
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xinhuang

铁杆木虫 (著名写手)
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6楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-29 14:40:10
用管子方便些。玻璃瓶加转子大量还行（几百g），少量树脂损失太大。反应器一定要好好硅烷化。摇床转速120rpm左右，室温。fmoc固相法一般没问题的。但如果lz用的不是商业化的树脂（王树脂，renk树脂，二氯三苯甲基树 ...

多谢兄台指导，以前没有做过，用的是买的玻璃微球CPG，机械强度就不清楚了。
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7楼2013-09-29 14:49:51
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hl16010921

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by xinhuang at 2013-09-29 14:49:51
多谢兄台指导，以前没有做过，用的是买的玻璃微球CPG，机械强度就不清楚了。...

玻璃微球CPG好像是用来合核酸的吧。LZ只合成多肽的话，还是用商业化树脂好些。毕竟这种固相载体没用过，会不会出现溶剂化或位阻问题不好说。
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8楼2013-09-29 14:59:37
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xinhuang

铁杆木虫 (著名写手)
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8楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-09-29 14:59:37
玻璃微球CPG好像是用来合核酸的吧。LZ只合成多肽的话，还是用商业化树脂好些。毕竟这种固相载体没用过，会不会出现溶剂化或位阻问题不好说。...

是做核酸的，不过我先修饰几个酰胺键上去，之后再做PCR，文学中有报道这么做的。
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9楼2013-09-29 15:08:54
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hl16010921

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by xinhuang at 2013-09-29 15:08:54
是做核酸的，不过我先修饰几个酰胺键上去，之后再做PCR，文学中有报道这么做的。...

好像是多肽和DNA直接连接，好高端的样子。只能尝试了。
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10楼2013-09-29 15:26:09
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