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cao.qin

木虫 (正式写手)

[求助] 固相合成多肽后的分离提纯

小弟才刚开始接触固相多肽合成,问题多多,实验室没有制备型的HPLC,想问问大虾们有没有什么其他的分离提纯方法呢?求高人指点啊,本人感激不尽啊,跪谢!!!!
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能为别人设想的人,永远不寂寞
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落满夏天

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by cao.qin at 2013-03-22 21:34:32
就是说我们自己买一个反相硅胶柱,自己来慢慢分离吗?请指点迷津...

用反相制备柱,预装柱的柱效没有问题,能分开。小肽用反相制备的很多。
星星之火,可以燎原
14楼2013-07-17 13:14:33
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普通回帖

落满夏天

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cao.qin: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-03-22 14:31:23
看多大的肽吧,一般小肽都是用反相精制,有的也用离子交换,其他的不太清楚了,离子交换可以试试,别的可以再看看疏水什么的!
星星之火,可以燎原
2楼2013-03-22 11:17:46
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cao.qin

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 落满夏天 at 2013-03-22 11:17:46
看多大的肽吧,一般小肽都是用反相精制,有的也用离子交换,其他的不太清楚了,离子交换可以试试,别的可以再看看疏水什么的!

我做的都是五肽以内的小分子多肽,主要是用来做组装,纯度要求比较高
能为别人设想的人,永远不寂寞
3楼2013-03-22 14:32:38
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cao.qin: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-22 21:34:42
这么小的肽段怕是用制备柱分不开吧,还是用普通柱慢慢制备效果好

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2013-03-22 16:21:04
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cao.qin

木虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by joan198108 at 2013-03-22 16:21:04
这么小的肽段怕是用制备柱分不开吧,还是用普通柱慢慢制备效果好

就是说我们自己买一个反相硅胶柱,自己来慢慢分离吗?请指点迷津
能为别人设想的人,永远不寂寞
5楼2013-03-22 21:34:32
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Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师


【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-03-23 08:08:08
这个是短肽,平时普通的层析柱应该就是可以的,不过还是hplc快……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2013-03-22 21:37:24
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-03-23 08:07:53
引用回帖:
5楼: Originally posted by cao.qin at 2013-03-22 21:34:32
就是说我们自己买一个反相硅胶柱,自己来慢慢分离吗?请指点迷津...

是的,虽然笨了点,并且比较浪费时间,但是分离效果很好,我同门正在分离收集呢
7楼2013-03-23 03:59:45
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分离高手

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+5, 鼓励新虫发帖,尤其是很到位的应助 2013-03-24 08:49:44
cao.qin: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-03-26 08:40:09
这种几个氨基酸的多肽,相对比较好分,就几种物质。柱子不是关键,关键是填料,你可以选择反向的硅胶填料,或者选择反相的聚合物填料。比较难分者两者结合。如做甘精胰岛素,我们用SKP-10-4300聚合物反相填料+C8。做胸腺法新,用C18。有些小分子多肽的直接用聚合物反相填料就直接分开了。你就慢慢过柱子吧呵呵。当然还是好好选择下填料,最好多试几种,粒径和孔径你的选择小的,至少孔径你得选择小点的,个人认为。注意不同厂家的孔径的微小差别,比如100埃  110埃  120埃 现在比较乱。呵呵
8楼2013-03-23 14:18:25
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lonelyhere

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-03-24 08:50:00
一般反态采用实验精制的
9楼2013-03-23 19:23:16
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cao.qin

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 分离高手 at 2013-03-23 14:18:25
这种几个氨基酸的多肽,相对比较好分,就几种物质。柱子不是关键,关键是填料,你可以选择反向的硅胶填料,或者选择反相的聚合物填料。比较难分者两者结合。如做甘精胰岛素,我们用SKP-10-4300聚合物反相填料+C8。做 ...

谢谢,我们试试看,可不可以加你QQ呢?
能为别人设想的人,永远不寂寞
10楼2013-03-26 08:40:58
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