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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 固相合成多肽后的分离提纯
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cao.qin

木虫 (正式写手)

[求助] 固相合成多肽后的分离提纯

小弟才刚开始接触固相多肽合成，问题多多，实验室没有制备型的HPLC，想问问大虾们有没有什么其他的分离提纯方法呢？求高人指点啊，本人感激不尽啊，跪谢！！！！
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能为别人设想的人，永远不寂寞
1楼 2013-03-22 09:43:50
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

落满夏天

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cao.qin at 2013-03-22 21:34:32
就是说我们自己买一个反相硅胶柱，自己来慢慢分离吗？请指点迷津...

用反相制备柱，预装柱的柱效没有问题，能分开。小肽用反相制备的很多。
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星星之火，可以燎原
14楼2013-07-17 13:14:33
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普通回帖

落满夏天

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cao.qin: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-03-22 14:31:23
看多大的肽吧，一般小肽都是用反相精制，有的也用离子交换，其他的不太清楚了，离子交换可以试试，别的可以再看看疏水什么的！
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星星之火，可以燎原
2楼2013-03-22 11:17:46
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cao.qin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 落满夏天 at 2013-03-22 11:17:46
看多大的肽吧，一般小肽都是用反相精制，有的也用离子交换，其他的不太清楚了，离子交换可以试试，别的可以再看看疏水什么的！

我做的都是五肽以内的小分子多肽，主要是用来做组装，纯度要求比较高
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能为别人设想的人，永远不寂寞
3楼2013-03-22 14:32:38
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
cao.qin: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-22 21:34:42
这么小的肽段怕是用制备柱分不开吧，还是用普通柱慢慢制备效果好
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

cao.qin
4楼2013-03-22 16:21:04
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cao.qin

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by joan198108 at 2013-03-22 16:21:04
这么小的肽段怕是用制备柱分不开吧，还是用普通柱慢慢制备效果好

就是说我们自己买一个反相硅胶柱，自己来慢慢分离吗？请指点迷津
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能为别人设想的人，永远不寂寞
5楼2013-03-22 21:34:32
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Greatben

银虫 (小有名气)

研发工程师

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-03-23 08:08:08
这个是短肽，平时普通的层析柱应该就是可以的，不过还是hplc快……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2013-03-22 21:37:24
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-03-23 08:07:53
引用回帖:
5楼: Originally posted by cao.qin at 2013-03-22 21:34:32
就是说我们自己买一个反相硅胶柱，自己来慢慢分离吗？请指点迷津...

是的，虽然笨了点，并且比较浪费时间，但是分离效果很好，我同门正在分离收集呢
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7楼2013-03-23 03:59:45
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分离高手

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+5, 鼓励新虫发帖，尤其是很到位的应助 2013-03-24 08:49:44
cao.qin: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-03-26 08:40:09
这种几个氨基酸的多肽，相对比较好分，就几种物质。柱子不是关键，关键是填料，你可以选择反向的硅胶填料，或者选择反相的聚合物填料。比较难分者两者结合。如做甘精胰岛素，我们用SKP-10-4300聚合物反相填料+C8。做胸腺法新，用C18。有些小分子多肽的直接用聚合物反相填料就直接分开了。你就慢慢过柱子吧呵呵。当然还是好好选择下填料，最好多试几种，粒径和孔径你的选择小的，至少孔径你得选择小点的，个人认为。注意不同厂家的孔径的微小差别，比如100埃  110埃  120埃 现在比较乱。呵呵
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8楼2013-03-23 14:18:25
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lonelyhere

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-03-24 08:50:00
一般反态采用实验精制的
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9楼2013-03-23 19:23:16
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cao.qin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 分离高手 at 2013-03-23 14:18:25
这种几个氨基酸的多肽，相对比较好分，就几种物质。柱子不是关键，关键是填料，你可以选择反向的硅胶填料，或者选择反相的聚合物填料。比较难分者两者结合。如做甘精胰岛素，我们用SKP-10-4300聚合物反相填料+C8。做 ...

谢谢，我们试试看，可不可以加你QQ呢？
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能为别人设想的人，永远不寂寞
10楼2013-03-26 08:40:58
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