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走在路上ing

金虫 (初入文坛)

[求助] 蒽酮比色法测水稻幼苗可溶性糖、淀粉的含量已有1人参与

蒽酮比色法测水稻幼苗可溶性糖、淀粉的含量,包括具体的实验步骤,以及注意事项
     越详细越好
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独行尊者

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by nkylgx at 2014-05-13 16:19:25
可溶性总糖的测定(蒽酮比色法)
摘要: 一、目的 掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。 二、原理 强酸可使糖类脱水生成糠醛,生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合,形成糠醛的衍生物,呈蓝绿色,该物质在  ...

想问下1.硫酸蒽酮试怎么加的,用的5ml的枪,可是挂壁时间长,吸取和打出都比较慢,影响整体试验结果么,
2.蒽酮是避光的么,
3.硫酸加入蒽酮过量一点没什么问题吧,领导好像这么说的,硫酸蒽酮保证硫酸足够就行
4.水浴的时候放多少水,淹没液面就行了么?
5.我这水浴是二十分钟,看网上说十分钟的比较多,如果忘记计时或者时间到了没取出来会有多大影响,值是会偏高还是低,看网上说有新的反应发生,具体什么反应还没查到
6.还有你的思考题,标准曲线制作还有哪些要注意的,
谢谢了,最近做的几次结果都不是很好
博学笃行,厚德载物
11楼2014-10-14 18:31:55
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314584069

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
走在路上ing: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-09-28 10:26:39
蒽酮比色法
1、试剂
(1).1%蔗糖标准液  将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重,精确称取1.000g。加少量水溶解,移入100ml容量瓶中,加入0.5ml浓硫酸,用蒸馏水定容至刻度;
(2).100μg/ml蔗糖标准液  精确吸取1%蔗糖标准液1ml加入100ml容量瓶中,加水定容。
(3).蒽酮乙酸乙酯试剂:取分析纯蒽酮1g,溶于50ml乙酸乙酯中
(4)标准曲线:
管号        0        1        2        3        4        5
100μg/ml蔗糖液(ml)        0        0.2        0.4        0.6        0.8        1.0
水(ml)        2.0        1.8        1.6        1.4        1.2        1.0
蔗糖量(μg)        0        20        40        60        80        100
按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸,充分振荡,立即将试管放入沸水浴中,逐管均准确保温1min,取出后自然冷却至室温,以空白作参比,在630nm波长下测其光密度,以光密度为纵坐标,以糖含量为横坐标,绘制标准曲线,并求出标准线性方程。
2、测定方法    可溶性糖的提取(鲜样)
     取新鲜甘薯样品,擦净表面污物,剪碎混匀,称取1 g,放入带刻度试管中,加入10mL 蒸馏水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取3次),提取液过滤入100mL容量瓶中,反复冲洗试管及残渣,定容至刻度。
显色测定 :吸取1ml糖提取液定容至100ml,吸取样品稀释液2ml于20ml刻度试管中(重复2次),按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸,充分振荡,立即将试管放入沸水浴中,逐管均准确保温1min,取出后自然冷却至室温,以空白作参比,在630nm波长下测其光密度、由标准曲线查得待测液的含糖量。
3、结果计算   
可溶性糖含量(mg/g)=C*V/( a*m*1000)  式中  C-标准方程求得糖量(μg);a-吸取样品液体积(ml);V-提取液量(ml);m-称样质量(g)。
根据不同作物,因含糖量不同,稀释倍数自己摸索,希望对你有所帮助!
2楼2013-09-28 08:12:38
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走在路上ing

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 314584069 at 2013-09-28 08:12:38
蒽酮比色法
1、试剂
(1).1%蔗糖标准液  将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重,精确称取1.000g。加少量水溶解,移入100ml容量瓶中,加入0.5ml浓硫酸,用蒸馏水定容至刻度;
(2).100μg/ml蔗糖标准液  精确吸取1%蔗糖标 ...

我需要可溶性糖、淀粉分别测,这样只能测可溶性糖,但还是谢谢
3楼2013-09-28 10:29:45
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314584069

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 走在路上ing at 2013-09-28 10:29:45
我需要可溶性糖、淀粉分别测,这样只能测可溶性糖,但还是谢谢...

貌似一起测得是还原糖吧
4楼2013-09-28 19:32:51
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