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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 让人恼火的涂平板计数，求助~~
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jianandy

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by 生院深似海 at 2013-09-25 18:39:40
我摇菌用的20ml培养液。稀释的时候都是稀释成1ml。比如稀释10倍，就在EP管中加900ul灭菌的超纯水，再加100ul菌液~...

100微升菌液加900微升超纯水，培养液中的离子浓度降低了10倍，其他稀释度下离子浓度降低的更多，细菌细胞基本上都溶胀破裂了，怎么还可能生长？楼主说细菌不长，很有可能是渗透压变了。建议用与培养基相同盐浓度的溶液稀释。
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11楼2013-09-25 23:19:07
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 生院深似海 at 2013-09-25 18:37:49
哦~我还真没用OD值估算过~那麻烦问下，一般OD值怎么估算成浓度呢？？如果是凭经验，能给举几个对应的例子不？3Q~~...

一般OD600=1时的细胞数在10的8-9次方。
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12楼2013-09-26 03:03:01
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
大肠杆菌 OD（600）=1 约为10E9/mL

稀释不长，不外乎培养基不行、培养过程中是细菌受到抑制、原始菌就死了几个原因
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环境卫生、微生物学、卫生应急
13楼2013-09-26 14:42:45
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sam-lifei

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们实验室最开始做大肠时候隔夜培养然后侧OD，稀释涂布，大约稀释到-6次时候取50uL涂布很稳定的。我同学做流式细胞仪，听说是分几个区域，活的死的和抑制的？那个你算的是他的活菌数还是抑制菌的数都加起来了？抑制的话是不是培养的条件和活菌是有区别的？或是说比活菌要苛刻才可以生长？你看看培养基可不可以换个试下。
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14楼2013-09-29 22:07:44
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rainbowlulu

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by sam-lifei at 2013-09-29 22:07:44
我们实验室最开始做大肠时候隔夜培养然后侧OD，稀释涂布，大约稀释到-6次时候取50uL涂布很稳定的。我同学做流式细胞仪，听说是分几个区域，活的死的和抑制的？那个你算的是他的活菌数还是抑制菌的数都加起来了？抑制 ...

哟？？你同学是用流式细胞仪做细胞的还是做微生物的啊？？如果是做微生物计数的那真想请教一下！！恩，我也觉得应该是有被抑制的菌，但是也不知道用什么培养基好。。。正琢磨中。。。
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15楼2013-09-30 17:03:06
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sam-lifei

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
15楼: Originally posted by rainbowlulu at 2013-09-30 17:03:06
哟？？你同学是用流式细胞仪做细胞的还是做微生物的啊？？如果是做微生物计数的那真想请教一下！！恩，我也觉得应该是有被抑制的菌，但是也不知道用什么培养基好。。。正琢磨中。。。...

我同学算是微生物计数吧，不过他不是专门做这个，是顺便做的一个，做益生菌的。被抑制的菌营养丰富点培养时间长点也长不出么？
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16楼2013-09-30 19:31:10
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lmqml24

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
17楼2013-10-04 23:21:55
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生院深似海

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
16楼: Originally posted by sam-lifei at 2013-09-30 19:31:10
我同学算是微生物计数吧，不过他不是专门做这个，是顺便做的一个，做益生菌的。被抑制的菌营养丰富点培养时间长点也长不出么？...

培养时间长点是多久呢？？我试过4天 还是没长出来什么~应该算久了吧~呼呼
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18楼2013-10-09 12:54:36
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sam-lifei

金虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 生院深似海 at 2013-10-09 12:54:36
培养时间长点是多久呢？？我试过4天 还是没长出来什么~应该算久了吧~呼呼...

是够久了。。。我知道有限，帮不上你了。看看有木有大神可以出手。
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19楼2013-10-09 19:19:13
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lucas314

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
20楼2014-05-24 17:26:05
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