应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 让人恼火的涂平板计数，求助~~
221/3返回列表123下一页
查看: 3098  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

生院深似海

金虫 (初入文坛)

[求助] 让人恼火的涂平板计数，求助~~ 已有2人参与

最近需要对菌液进行培养并计数~我通常都是先用流式细胞仪测出菌液浓度，再根据这个数据进行梯度稀释，然后涂平板~一般做4个梯度，将菌液稀释到10的1次、2次、3次、4次方，这样涂~但是，实验结果总是不稳定，大多数时候不长菌。。。很让人恼火~大家有没有类似经历，帮我看看哪里出为题了呗~！！非常感谢~
我养的菌是大肠和金黄，寡营养条件摇的，大概把LB培养液稀释了一万倍以上~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-09-24 22:50:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

jianandy

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by 生院深似海 at 2013-09-25 18:39:40
我摇菌用的20ml培养液。稀释的时候都是稀释成1ml。比如稀释10倍，就在EP管中加900ul灭菌的超纯水，再加100ul菌液~...

100微升菌液加900微升超纯水，培养液中的离子浓度降低了10倍，其他稀释度下离子浓度降低的更多，细菌细胞基本上都溶胀破裂了，怎么还可能生长？楼主说细菌不长，很有可能是渗透压变了。建议用与培养基相同盐浓度的溶液稀释。
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2013-09-25 23:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-09-25 16:25:47
我一般直接测OD估算菌的大致浓度，然后梯度稀释的。一般做三个梯度就可以了。不清楚是不是流式细胞仪的问题。
赞一下 回复此楼
2楼2013-09-25 02:32:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangfei179

木虫 (小有名气)
万分之一LB，多少度培养，养多久？
赞一下 回复此楼
3楼2013-09-25 10:39:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lmqml24

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2013-09-25 12:57:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生院深似海

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wangfei179 at 2013-09-25 10:39:20
万分之一LB，多少度培养，养多久？

37℃，养4天~ 用的原浓度固体培养基，应该没问题吧？
赞一下 回复此楼
5楼2013-09-25 18:35:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生院深似海

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-09-25 02:32:33
我一般直接测OD估算菌的大致浓度，然后梯度稀释的。一般做三个梯度就可以了。不清楚是不是流式细胞仪的问题。

哦~我还真没用OD值估算过~那麻烦问下，一般OD值怎么估算成浓度呢？？如果是凭经验，能给举几个对应的例子不？3Q~~
赞一下 回复此楼
6楼2013-09-25 18:37:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生院深似海

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lmqml24 at 2013-09-25 12:57:42
楼主能把具体操作说明确点吗？梯度稀释和你选择的稀释体积，培养基摇匀程度关系很大，体积太小的话，误差是很大的。

我摇菌用的20ml培养液。稀释的时候都是稀释成1ml。比如稀释10倍，就在EP管中加900ul灭菌的超纯水，再加100ul菌液~
赞一下 回复此楼
7楼2013-09-25 18:39:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lxcuty

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
自己也曾经出现过这种问题，很可能是由于你的菌液浓度本身已经很低在5次方左右，你又稀释了4次方的基础上又稀释四个梯度，从而导致你大部分的涂平板不长菌。其实你微生物的计数你可以尝试一下倾注法，这个很简便适合微生物的计数。希望对你有所帮助。
赞一下 回复此楼
8楼2013-09-25 20:33:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mengtaji

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会是涂布棒太热了没凉下来，，，我以前是这种原因过
赞一下 回复此楼
天道酬勤
9楼2013-09-25 21:03:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

生院深似海

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by mengtaji at 2013-09-25 21:03:34
会不会是涂布棒太热了没凉下来，，，我以前是这种原因过

NONO，绝对不是，我每次涂之前都要在手腕上试过的~基本都彻底凉了才涂。。。
赞一下 回复此楼
10楼2013-09-25 21:55:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 生院深似海 的主题更新
221/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 11:52 by l0VvVHGBGRLv
[考博] 找导师 +5 yuanjiabao 2026-08-29 6/300 2026-08-30 11:52 by zhouyanli11
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 11:51 by l0VvVHGBGRLv
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +8 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 9/450 2026-08-30 11:40 by l0VvVHGBGRLv
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 11:07 by l0VvVHGBGRLv
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:28 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-30 07:17 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 06:55 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-30 06:11 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 11/550 2026-08-30 06:00 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 4/200 2026-08-30 02:09 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭