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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相色谱 图解
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chenhw06

金虫 (正式写手)

[求助] 液相色谱 图解

请大家帮忙看一下，下图是我的HPLC谱图，条件:C8，v=1ml/min，流动相:乙腈：水=2：1。第一个是全扫描图，第二个是278nm下的2D图，第三个是部分放大了的2D图，我的目标物是1.51左右那个峰，可是峰形状很奇怪，我怀疑是两个没有分开的峰，但是又觉得1.4min~1.58min可能都是我的目标物，但是不知道为何峰形会那么丑。最后有个图是我试用C18测的标品图，峰形也很奇怪。请大家帮忙看一下。
液相色谱 图解
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液相色谱 图解-1
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液相色谱 图解-2
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液相色谱 图解-3
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今生不见，来世无缘
1楼 2013-09-12 15:06:18
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chenhw06

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by crity328 at 2013-09-12 16:00:05
你这个图，出锋时间太快了，干扰太大，建议增加水的比例重新做下。

我之前流动相1：1和3：1也都试过，结果是2：1峰形线性都比较好，我想问一下，全波段扫描图除了能看出最大吸收波长能看出第二个圈圈是一个物质嘛，我在网上没搜到具体解析方法
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今生不见，来世无缘
4楼2013-09-12 16:20:13
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chenhw06

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by helenhao at 2013-09-12 16:14:11
标准品的谱图：楼主是不是使用纯乙腈溶解的？换成流动相溶解后可能会消除前沿。如果标准品是极性较大的物质，建议加点磷酸（比如0.1%），调一下ph值。

样品谱图：你用的是二极管阵列检测器，可以看看2个峰的光谱 ...

因为我样品都是先取样然后用乙腈稀释，所以标品就也是纯乙腈稀释的。您说的看两个峰的光谱图，是这个谱图和标品谱图比较吗？标品测出来的峰形还可以，出峰时间是1.51左右。既然两位都建议增大水比例，那我重新试一下看看。多谢~
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今生不见，来世无缘
5楼2013-09-12 16:54:57
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chenhw06

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by da1234mao at 2013-09-12 21:54:00
这两个的紫外吸收是一样的，估计是你的浓度太大了，稀释在做下，我遇到过这种现象，Waters的EMPOWER BA

确实是waters的empower，我是样品稀释了1000倍后检测的，0.3mg/ml左右，感觉应该不算大了吧。不过我今天重新跑了一下，竟然正常了，无语啊。
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今生不见，来世无缘
9楼2013-09-15 12:19:24
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chenhw06

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by dzf_dhx at 2013-09-12 22:26:51
“H”PLC嘛》？出峰太早了。看你多长的柱子，1mL/min，长柱子4min前的峰都不能定性定量的。

C8的短柱子了，定性定量是没问题啦~
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今生不见，来世无缘
10楼2013-09-15 12:20:17
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chenhw06

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by crity328 at 2013-09-12 19:26:35
你可以对比你的 样品图和标准图是否具有相同的吸收波长，用二极管阵列检测器 是可以能看到的，如果2个图的吸收图谱不一致就说明有干扰，如果是一致的话，明显就是你的色谱条件还需要进一步优化。你的峰型是完全达不 ...

很感谢回答，我今天重新取样检测了，不知为何峰形竟然正常了。不过有一事不解，因为我把峰形正常的图（之前的很多样品）的全波段扫描图看了一下，跟标品的也是不一致的，我不解，是不是必须标品和样品的全波段扫描图必须完全一致才说明没有干扰？
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今生不见，来世无缘
11楼2013-09-15 12:24:52
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