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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lillian菲

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] PCR大片段问题 已有2人参与

大家好，最近在p片段基因，大概有7500bp，因为需要做后续好多试验，需要PCR产物较多。之前PCR结果很好，最近p的结果总不理想。需要的条带在8000bp左右，但结果在6000bp的条带很亮，根本没法做胶回收，求大家帮忙解决，很急！
PCR大片段问题
360截图20130909163226089.jpg
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1楼 2013-09-09 16:33:27
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lillian菲

超级版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
10楼: Originally posted by liujianmin68 at 2013-09-11 08:05:24
根据你的情况，建议你用touch down PCR进行扩增，先用较高的退火温度扩增几个循环，然后在选择合适的退火温度。
如果上面的方法不凑效，你可以选择更好质量的酶进行扩增。比如: TOYOBO公司的KOD FX、TaKaRa公司的T ...

谢谢了，我会尝试下的
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11楼2013-09-11 08:37:10
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因为吃饭

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-09 20:15:50
产物的特异性不好，提高退火温度呢？
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lillian菲
辩证。
2楼2013-09-09 16:41:44
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南海所老龚

专家顾问

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
楼主用什么酶，扩这么大的片段？
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TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
3楼2013-09-09 21:41:22
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凌波丽

新虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先考虑使用专一性高的DNA聚合酶。
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4楼2013-09-10 08:39:12
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