| 查看: 1122 | 回复: 0 | ||
shaojh木虫 (著名写手)
|
[求助]
求助植物叶片CAT和APX酶活性测定的问题！期待您的帮助。
|
|
1.APX活性测定方法：2.5 ml 反应混合液包含 50 mM 磷酸盐缓冲液（pH 7.0），1mM EDTA，0.5 mM 抗坏血酸和 1 mM H2O2。反应的启动由加入 40 μL粗酶液，然后观测并记录随后 60 s 内在 290 nm 处吸光值的变化（Barka ，2001）。 存在的问题：（1）如果将酶液加入反应液后（比色皿）如果摇晃混匀后，测定值几乎不会发生变化。（用移液枪反复吹打也是类似效果） （2）如果不摇晃混匀，则测得的三个重复测定值差异很大，包括初始值和测定差值。 （3）也尝试了先加酶液，后加反应液混合，数值也是不稳定，60秒内差值很小为0.0X或0.00x。 请教做过类似实验的朋友，能够帮我解释下我的问题出在哪里？应该怎么做才能取得较好的效果？ 比如： 0-60‘ 10’读数 0.035，0.029，0.035，0.030，0.026，0.024，0.023 0.104，0.104，0.107，0.106，0.104，0.102，0.100 0.135，0.125，0.130，0.128，0.125，0.124，0.122 2.CAT 活性测定：2.5 ml 反应混合液包含 100 mM 磷酸盐缓冲液（pH 7.5）和 75 μL 粗酶液。反应的启动由加入 7.5 μL 34.8 mM H2O2，然后观测并记录随后 60 s 内在 240 nm 处吸光值的变化（Azevedo et al. 1998）。 存在问题：同上；测了三分钟，10‘一读数，吸光值总体先变大后变小，也有的数值是一直变小，极个别是一直变大。头痛死了，求助。 [ Last edited by shaojh on 2013-9-6 at 11:56 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
304求调剂（085602，过四级，一志愿985）
已经有18人回复
-
软工学硕299求调剂
已经有6人回复
-
一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂
已经有6人回复
-
化工调剂303分，过四级
已经有30人回复
-
264求调剂
已经有4人回复
-
生物工程求调剂
已经有9人回复
-
266求调剂
已经有23人回复
-
283求调剂
已经有15人回复
-
22408 一志愿双一流人工智能300分 四六级，数据分析国奖
已经有5人回复
-
286求调剂
已经有17人回复
找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~
急求 植物CAT酶活的测定方法 ！！！
已经有18人回复
- 叶片抗氧化酶活性测定方法
已经有22人回复
- 过氧化氢的吸光度问题
已经有7人回复
- 植物CAT活性测定结果的计算方法
已经有15人回复
- SOD POD CAT MAD试剂盒测定
已经有9人回复
- 有颜色变化的酶反应
已经有12人回复
- 关于几种抗氧化酶活性（CAT POD）测定的问题~
已经有17人回复
- 关于植物抗逆性的实验测定
已经有4人回复
- 测定植物酶类（POD、CAT、APX），问题请教
已经有10人回复
- CAT或POD过氧化氢酶和过氧化物酶的单位是什么？
已经有7人回复
- 分光光度计测定酶活中的问题
已经有9人回复
- 【求助/交流】分光光度计测出的吸光值如何计算CAT,APX,POD？
已经有11人回复
- 【求助/交流】求助：水稻叶片抗坏血酸（APX）酶活性的测定方法（望做过此类实验的同学
已经有5人回复
点击这里搜索更多相关资源科研从小木虫开始，人人为我，我为人人
