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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于氧化亚铁硫杆菌细胞计数的问题
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sheepdawn

木虫 (小有名气)

[求助] 关于氧化亚铁硫杆菌细胞计数的问题

因为实验中有时候需要一定的细菌浓度，所以小弟我想对氧化亚铁硫杆菌经行细菌计数。我的想法是OD600对细菌浓度的标准曲线，这样每次直接测OD值就可以了，不用每次都去计数。但是现在不知道细菌计数的公式是什么，有的写的是：16格×25格的细胞计数板计算公式：细胞数/ml=100小格内细胞个数/100×400×10000×稀释倍数；有的写的是：细胞数/mL=四大格细胞总数/4×104 ×稀释倍数，所以不知道到底用那个公式呢？此外，我的氧化亚铁硫杆菌菌体实在是太小了，相差显微镜400倍下都非常小，而此时计数板的刻度线都显得很大，实在不方便，不知道大家有什么好的方法没有，谢谢大家！
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1楼 2013-09-04 15:54:23
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wanghuiyanyx

金虫 (著名写手)
qPCR，Af菌难以直接计数。
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3楼2013-09-05 09:46:21
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skpom

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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sheepdawn: 金币+5, ★有帮助 2013-09-10 16:04:49
sheepdawn: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-10-12 15:14:28
给你提供几篇参考文献，不知会不会有所帮助：
1、《氧化亚铁硫杆菌的菌数测定法》
作者：张冬艳
《内蒙古工业大学学报(自然科学版)》 1996年01期 加入收藏 获取最新
摘要】：本文根据氧化亚铁硫杆菌（Ｔｋｉｏｈａｃｉｌｌｕｓｆｅｒｒｏｏｘｉｄｓａｎｓ）培养基成分的特性，从多种染色液中筛选出一种草酸铵结晶紫染液，该染液能使菌体染成蓝色，不形成氢氧化铁沉淀，并阐述了不形成沉淀的原因．经统计学方法处理，草酸铵结晶紫涂片染色法应用于氧化亚铁硫杆菌菌数测定，结果准确可靠，较血球计数器法更为快速、简便．除了能测定液相中的菌数，还能测定矿物颗粒表面吸附的细菌．

2、《氧化亚铁硫杆菌显微镜直接计数法的改进》
《国外金属矿选矿》1998年第04期 作者：魏以和,王营茹,钟康年
目前，利用氧化亚铁硫杆菌生物浸出提取金属的研究和应用热潮正在国内悄然兴起。生物没出的一个重要因素就是生物量或细菌数量的监测．细菌计数的方法很多，常用的有：显微镜直接计数法、平板菌落计数法、光电比法法、生物量测量法、DNA含量测定法等．其中适于实验室快速检验的简便方法是显微镜直接计数法和生物量测量法”’．显微镜直接计数法一般是利用专用的细菌计数板（Bact日公CountirpChamber）．也有使用血球计数板来计量的，但由于氧化亚铁硫杆菌个体非常小，观察计数需用焦距很小的高倍油镜，而血球计数极的计数室较深，显微镜可观察的液体深度（焦深）极小，无法将盖玻片与平台间全部液层的细菌加以辨认，故计数误差较大’“”。生物量湿量法程序较繁琐，而且只适于10’级以上菌浓度的计数‘“：另外，对不同的菌株或混合酋，由于菌体大小不一，计数则不准确。本文利用现代电子CCD固体成像技术，改装普通生物显微镜，使之可用血球计数板直接计数细菌．整个改装过程简单，成本低廉；经改装后的显微镜计数氧化亚铁硫杆菌方便、迅速、准确．2显微镜及显微计数法原理
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2楼2013-09-05 09:38:31
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