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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 分析多肽，多次进样后拖尾？怎么办？
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baby88

金虫 (初入文坛)

[求助] 分析多肽，多次进样后拖尾？怎么办？

在纯化多肽过程中，分析纯化的馏分，进多次样品后，发现有拖尾现象，而且越来越严重，而首次进样时是没有这个问题的。
分析柱:Kromasil 100A,5C18,250*4.6mm,
流动相:水，ACN,(都加0.1%TFA )。
试了80%ACN冲洗柱子，没能解决。
各位，有啥建议没？

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1楼 2013-09-03 11:16:06
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baby88

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jgy2000 at 2013-09-04 10:22:19
换根耐酸柱，0.1%TFA的pH值相当低，普通柱根本就耐受不了几天

一般多肽的分析是这样的，流动相加0.1%TFA。可能我这个样品比较特别了，但柱子应该是没问题的。
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7楼2013-09-04 19:37:35
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
baby88: 金币+2, ★有帮助 2013-10-24 18:35:07
是否样品溶液有问题，照理说你这个流动相是有利于色谱柱封尾的。
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悲催的研发！
2楼2013-09-03 16:29:57
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baby88

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by e_liang369 at 2013-09-03 16:29:57
是否样品溶液有问题，照理说你这个流动相是有利于色谱柱封尾的。

溶液是和流动相相同的，那只能是样品问题了？还是可能这个分析方法不适用这个样品，那这个拖尾的原因是色谱柱的问题?  可开始的时候没有啊？
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3楼2013-09-04 06:36:35
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wy1518

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
baby88: 金币+4, ★有帮助, 谢谢。洗脱不完全，如何能证明呢？不进样的同样条件跑了下，没有再出峰的。 2013-09-04 19:39:47
引用回帖:
3楼: Originally posted by baby88 at 2013-09-04 06:36:35
溶液是和流动相相同的，那只能是样品问题了？还是可能这个分析方法不适用这个样品，那这个拖尾的原因是色谱柱的问题?  可开始的时候没有啊？...

是洗脱不完全 加大水的比例试试 或者换其他流动相 比如磷酸盐缓冲液

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4楼2013-09-04 07:38:21
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