| 查看: 1443 | 回复: 3 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
求助拟南芥SALK突变体纯合体鉴定中的问题
|
|||
|
我在鉴定SALK突变体纯合体过程中，发现以野生型的DNA为模板用LBb1+RP引物进行PCR的时候也能扩出同T-DNA插入突变体中相大小的条带，请教哪位高手给分析一下，为什么会这样，怎么解决此类问题？ 附件中的图为其中一次得结果，我分别用了三次提的Col DNA，结果都是一样的，请教高手解答，谢谢！  w122h2616138_1377696831_322.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
怎么查看固定段11位
已经有5人回复
-
可以准确的通过filecode判断基金中还是不中。
已经有15人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有208人回复
-
感觉普通人已经没办法玩了，躺平是唯一的出路。
已经有26人回复
-
江苏省优青门槛
已经有20人回复
-
心好累。今年我们部门提交了18个项目。中了11了，可惜我的又挂了
已经有10人回复
-
面上项目计划书
已经有7人回复
-
面上项目计划书附件
已经有9人回复
-
面上项目计划书系统状态
已经有18人回复
-
NSFC-UNEP（与联合国环境规划署）合作项目
已经有33人回复
-
和伊朗人合作
已经有32人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
求助中科院的拟南芥突变体库网址信息，还有从SALK买种子的检疫证明怎么办啊
已经有5人回复- 拟南芥突变体的种子如何从国外突变体库寄回来？
已经有3人回复
- 有关拟南芥突变体分离鉴定不出WT
已经有8人回复
- 关于拟南芥的Basta筛选
已经有4人回复
- 买了拟南芥突变体，不知道怎么支付
已经有10人回复
- 拟南芥叶子变深红色
已经有19人回复
- 拟南芥突变体问题
已经有7人回复
- 关于从美国购买拟南芥突变体 付款方式
已经有6人回复
- 拟南芥突变体购买、快递寄送问题
已经有8人回复
- 向国外突变体库求突变体～～
已经有5人回复
- 【求助/交流】诚心请教一个关于拟南芥突变体鉴定的问题
已经有17人回复
starseacow
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +426 - APEPI: 64
- 应助: 1217 (讲师)
- 金币: 9097.3
- 散金: 16445
- 红花: 226
- 帖子: 4669
- 在线: 2320.2小时
- 虫号: 1136974
- 注册: 2010-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
- 管辖: 动植物
4楼2013-08-31 06:21:42
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wangxp518559: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-08-31 10:26:58
感谢参与，应助指数 +1
wangxp518559: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-08-31 10:26:58
|
根据你的描述和我的经验，其实这种结果已经可以基本判断了： SALK lines中的1,2,3,6,8为纯合突变体。 尽管野生型有相同大小的条带，但是条带明显比你的SALK突变体要若的多，说明其很有可能只是非特异条带。 有必要完善一下你的实验，方法有： 1. 提高LBb1+RP的退火温度（2-5度），你很可能发现，野生型的非特异带消失了； 2. 更换LBb1引物为LBa1或者LBb1.3，可能会有更好的结果。 祝顺利！ |
2楼2013-08-30 11:26:45
chenzhu198
铁杆木虫 (著名写手)
版主
- 应助: 10 (幼儿园)
- 金币: 8996.8
- 散金: 35
- 红花: 2
- 帖子: 1145
- 在线: 645.7小时
- 虫号: 800511
- 注册: 2009-06-28
- 性别: GG
- 专业: 等离子体物理
3楼2013-08-30 19:33:24