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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC 主峰后杂峰有机相浓度低跑不出来，浓度高主峰前面杂峰有重合
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zq20068

铁虫 (初入文坛)

[求助] HPLC 主峰后杂峰有机相浓度低跑不出来，浓度高主峰前面杂峰有重合

最近在摸方法，色谱小白。请教各位大侠：
合成出来的物质杂比较多，当用流动相为甲醇：醋酸铵=70:30，流速为0.8时，主峰前面的杂峰可以跑出来，主峰拖尾，后面貌似有个杂峰跑不出来。调节流动相为甲醇：醋酸铵=75:25，流速0.8时，明显看见主峰后面的有杂峰，但依然没分开，主峰前的杂峰数量减少了，应该是杂峰重合了。这种情况要怎么办啊？想设置梯度洗脱，但也不知道如何设置？
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1楼 2013-08-29 12:37:37
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硅谷假日

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

为什么不用更低比例的甲醇－醋酸铵，是保留时间太长么，色谱里提高分离主要是从流动相，色谱柱两方面着手，换流动相，换柱。梯度暂时不建议使用，通常用于色谱保留相差很大的样品分离使用，样品每次都平衡，不烦躁么。
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自装填多种规格高效制备色谱柱，提供小分子难分离样品的纯化服务。
7楼2013-09-04 19:04:13
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e_liang369

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zq20068: 金币+1, ★有帮助 2013-08-29 18:00:51
你试试甲醇5%-80% 30min梯度洗脱看看，根据情况在微调梯度优化分离效果
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悲催的研发！
2楼2013-08-29 12:43:16
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j115090587

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zq20068: 金币+1, ★有帮助 2013-08-29 18:06:18
如果看到你的图谱我们更好帮你分析，笼统的跟你说就是，考虑梯度，考虑用乙腈！
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3楼2013-08-29 16:53:46
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zq20068

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by j115090587 at 2013-08-29 16:53:46
如果看到你的图谱我们更好帮你分析，笼统的跟你说就是，考虑梯度，考虑用乙腈！

谱图没弄下来，等明天去实验室搞下来。这个物质很让人无语，只溶于甲醇，我用甲醇溶解之后如果加水，就变得不透明，貌似在水中溶解度不大。用乙腈也不怎么溶，所以当时流动相没敢考虑乙腈。
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4楼2013-08-29 18:04:20
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