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飘零的叶子

新虫 (小有名气)

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[求助] western blot

最近在做wb，但是一直都不出结果，也换了新的抗体，还是不行，哪位大侠可以帮我分析一下这是什么原因啊，图片已经上传了，样品1的蛋白预测分子量是27kd，样品2的蛋白预测分子量为20kd，从sds-page上看的话与对照比较是在预测分子量大小有表达的，但是wb却不显色，这是为什么啊，难道那就不是我的蛋白？！大侠们，帮帮忙吧，真的快被折腾疯了，老板各种催各种逼啊

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1楼 2013-08-29 09:40:58

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

飘零的叶子

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引用回帖:

10楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-08-30 00:25:10
细菌在蛋白loading buffer里也会部分破碎，煮过后会完全破碎。所以所谓没有破碎的菌应该也算是全菌蛋白了。至于为什么抗体不识别，可能是所用抗体的特异性问题，或者是western本身没有做好。如果你能在考染的胶上看 ...

额，好吧，现在看来应该是western没有做好了