24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

mengxiaoruan

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 243.5
帖子: 11
在线: 1.9小时
虫号: 1657923
注册: 2012-03-02
专业: 果树学

[求助] HPLC，同样的方法，不出峰了，之后基线各种漂是什么问题？然后又各种问题

测的是花青苷，流动相是A：10%甲酸 B：甲醇，梯度洗脱。用的是waters的二极管阵列检测器。

前几天测试的时候换了根柱子，其余的方法什么的都没变。之前用的是dikma的，这根是waters的。以前有师兄测多酚的时候两根混用过，效果也不差很多。
但是，昨天测的花青苷，基线是好的，就是不出峰了，只有溶剂峰。

然后我就把柱子换成原来那根了，开始的时候基线不太平，然后又用超纯水，甲醇换比例冲了一会儿。然后，每次大概到10分钟左右的时候，基线就突然垂直阶梯式上扬了，然后上去之后还一直是平的，再也不下来。

平衡了好久都是这样。然后下午的时候还突然停了几秒电……

之后又拿10%甲醇、90%甲醇，纯甲醇各冲了两个小时吧。今天早上的时候，基线又平了。

拿标样试了，还是只有溶剂峰。然后提高标样浓度，还是只有溶剂峰。然后拿纯甲醇进样，还是只有溶剂峰（溶剂是甲醇）。但是到10分钟左右的时候，基线又开始飘了……原来样品的保留时间是8.4分钟左右。

之后又平衡基线一个小时，还是各种起伏的……

柱压一直较为稳定，2100-2200左右。尤其是昨天十分钟突然上扬的时候，我是盯着的，柱压那一段一直无变化。然后检测器以及柱子周围也没发现漏液现象。
温度是柱温箱控制的。
这个方法柱子标样等等都是上周才用过的，流动相是前天晚上配的，超声了。

求大神分析……

回复此楼