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上ODS开放柱如何操作
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历经3次硅胶柱上下来的一个馏分(合并了23管),量很多,极性较大(有一定的极性跨度),因硅胶板显示正相再分离的话效果不理想,所以想上反相柱再分分,用的是自己装的ODS开放柱,这里想请教: 1、上样时直接将样品混悬着上到柱体上面吗?这样的话我有2点担心: (1)样品中混有的洗脱不下来的成分(即不溶性成分,怎么洗脱也洗脱不下来,甚至是灰尘)最终会污染柱子。 (2)样品有一定粘性,会堵塞柱子。 2、上样时将样品用甲醇溶解后再上样吗?这样的话我有点担心: (1)样品难以用少量溶剂溶解(无论加热、超声等处理),所以样液体积很大,极不利于分离。 因为样品的成分极性还有一定跨度,ODS薄层板显示有7-9个点,且样品总量较多,我只是想通过此次ODS柱分离,将样品进一步砍段,有幸的话能拿到一两个单体最好。但操作起来实在是让我为难,真正请教各位,尤其是亲自做过ODS开放柱的高手们能指点一二,内心无比感激! |
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