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shangxin6666

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1)市售磷酸浓度是85%,配的时候直接加100mL。
2)空白样直接用水就行,不用加染色液。
11楼2013-08-16 17:44:07
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花雨sky

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-11-23 14:24:43
空白的值应该为零才对的,因为里面没有蛋白的嘛。我当时做的标曲0.9997,方法和你的一样,只是蛋白标液我稀释了(依据样品吸光度而定的),还有我用的玻璃比色皿,对了,经验之谈,考马斯每次加样之前都要充分摇匀,加完样后每个试管都要同一方向同一力度振荡十次左右,放置十五分钟,每个样测之前都要摇匀后再测。祝你好运,每次加样都要小心,尤其是蛋白标样哟,加油
12楼2013-08-16 22:34:09
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nothaao

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by lovezxl3606 at 2013-08-16 17:02:21
你用水调零,看空白是什么意思,没明白;你的空白加的蛋白浓度是零啊,这个的吸光值就是个背景色啊,你要看他是多少干嘛?...

看背景值的吸光度啊~以前测氨氮,要看空白值的吸光度,如果吸光度偏高,说明纳氏试剂配的不合格,我想这个是一样的道理吧
13楼2013-08-20 10:32:25
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nothaao

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by sunnymen at 2013-08-16 17:03:14
直接买个试剂盒得啦,自己配确实麻烦,误差也大。再说考马斯亮蓝测蛋白本身误差都很大

哎,是的哇~结果是有的,不知道可信度多少
14楼2013-08-20 10:33:00
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sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-23 14:24:23
测定的时候不要用石英比色皿,容易吸附染料,造成实验误差,改用玻璃比色皿
15楼2013-08-21 14:24:48
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929519755

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by nothaao at 2013-08-15 12:02:04
具体过程是这样做的,我写出来吧,方便大家给我找毛病,是用分光光度计在595nm处测得,用的石英比色皿
取100mg考马斯亮蓝G-250溶于50mL 95%乙醇,加入100mL  85%磷酸,我看我的磷酸是优级纯,没写百分含量,应该是 ...

用玻璃比色皿把,考马斯亮蓝会与石英反应的
想你没话说
16楼2013-08-21 18:02:25
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霹雳光

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

有个试剂盒貌似对蛋白质定量很准确,用考马斯误差还是很大的
事实证明,除了你自己,不要指望任何一个人
17楼2013-08-26 10:20:41
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霹雳光

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

最近你测蛋白浓度测的怎么样啊?我最近也在测,求交流
事实证明,除了你自己,不要指望任何一个人
18楼2013-08-29 20:12:21
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-11-23 14:24:49
加标准液要用移液管,一般的移液枪不是很精确,每管的总体积要完全一样。
考马斯试剂自己配的应该不比买来的差多少,达到999还是很容易的。
19楼2013-11-23 14:08:18
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