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考马斯亮蓝法测蛋白质
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| 今天做了标准曲线,空白值得吸光度偏高,达到1.356,100mg/L的,加乙醇和酒精配的,配考马斯亮蓝的时候感觉颜色就比较深,是深蓝色,正常吗?线性一般,两个9,我就是觉得吸光度太高了,去掉空白的吸光度正常,怎么回事呢, |
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霹雳光
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17楼2013-08-26 10:20:41
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具体过程是这样做的,我写出来吧,方便大家给我找毛病,是用分光光度计在595nm处测得,用的石英比色皿 取100mg考马斯亮蓝G-250溶于50mL 95%乙醇,加入100mL 85%磷酸,我看我的磷酸是优级纯,没写百分含量,应该是100%吧,所以我加了85mL,定容到1L 颜色比较深,所以空白高, 取0.01G牛血清蛋白,溶解后定容到100mL 标曲加入0,0.2,0.4,0.6,0.8,1mL标准溶液,补充水位1mL,加入考马斯亮蓝5mL,混合,放置5MIN,在595NM测吸光度,我的吸光值分别为1.356,1.446,1.502,1.613,1.728,1.743 我是不是应该少加些考马斯亮蓝了,多加些标准溶液?各位大侠指导下撒 |
2楼2013-08-15 12:02:04
lovezxl3606
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3楼2013-08-15 14:42:58
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