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阿飞1990乖乖

荣誉版主 (职业作家)

优秀版主

[求助] HEK-293细胞又被污染了,捉急啊,恳请求各路大侠们帮忙分析一下!

我养的细胞是HEK-293细胞,人胚肾细胞。最近细胞总是出现污染的状况。
我分析了下:
1、第一次出现这种状况后,培养箱已消毒,而且培养箱里其他人的细胞都没问题,培养箱应该没问题了;

2、做了空白对照试验,把只放完全培养液的培养皿放培养箱里5天了,也没出现染菌的问题,所以培养液、血清应该没问题,同时证明培养箱没问题;

3、每次细胞复苏后,前两天细胞状态都很好,但是从第三天开始,就出现一些漂浮的白色小点,并且会长的越来越大,显微镜下观察,为絮状的团块。但是细胞没受影响,看起来状态还不错。

Question:我查了相关资料,怀疑是霉菌污染,是不是之前冻存的细胞出问题了,被真菌孢子污染了?请各位高手帮忙分析下,该怎么解决?
HEK-293细胞又被污染了,捉急啊,恳请求各路大侠们帮忙分析一下!
培养皿里出现的白色漂浮物.JPG


HEK-293细胞又被污染了,捉急啊,恳请求各路大侠们帮忙分析一下!-1
显微镜下的絮状物.JPG


HEK-293细胞又被污染了,捉急啊,恳请求各路大侠们帮忙分析一下!-2
03.png


HEK-293细胞又被污染了,捉急啊,恳请求各路大侠们帮忙分析一下!-3
293.png



[ 来自小组 食品科学 ]
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物来顺应,未来不迎,当时不杂,既过不恋。
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western虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
阿飞1990乖乖: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢您的建议,只能用新的细胞了。 2013-08-16 10:03:03
阿飞1990乖乖: 金币+8, ★★★★★最佳答案 2013-10-12 09:45:34
明显是真菌,多来自冻存或复苏的过程,霉菌容易交叉污染,不像细菌能用十倍抗生素解决,建议污染的细胞都处理掉,然后控制复苏过程,冻存管口在复苏的时候不要碰到水,水浴锅和培养箱的水最好也经常换,水里容易滋生霉菌。
ForDream!
7楼2013-08-16 08:41:59
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liying2718

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
阿飞1990乖乖: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢! 2013-08-15 10:55:19
1.首先建议你换种血清试试,这种情况血清污染较多见
2.排除你个人操作原因,不知道你平时操作习惯如何,没法判断
3.细胞冻存出了问题,那就重新找细胞株。
2楼2013-08-15 10:40:47
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阿飞1990乖乖

荣誉版主 (职业作家)

优秀版主

引用回帖:
2楼: Originally posted by liying2718 at 2013-08-15 10:40:47
1.首先建议你换种血清试试,这种情况血清污染较多见
2.排除你个人操作原因,不知道你平时操作习惯如何,没法判断
3.细胞冻存出了问题,那就重新找细胞株。

1、血清用的是2700块钱一瓶的澳洲胎牛血清。
下次做之前把血清用0.22um滤膜滤一下。
2、操作应该没问题,之前做了半年也没出现这个问题。以后会更小心的。
谢谢您的建议!
物来顺应,未来不迎,当时不杂,既过不恋。
3楼2013-08-15 10:59:49
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conanzzz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
阿飞1990乖乖: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢! 2013-08-15 18:58:10
很麻烦,像真菌......
4楼2013-08-15 11:08:45
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