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幽阶一夜苔生

新虫 (小有名气)

[求助] 细胞好像污染了,有图请研友给分析分析 已有2人参与

培养的癌细胞好像污染了,变浑浊,显微镜下看到密度很大的细沙状物质,请大家看看是不是细菌污染啊,另外还有玻片图和培养液的外观图。。谢谢了~

细胞好像污染了,有图请研友给分析分析
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细胞好像污染了,有图请研友给分析分析-1
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细胞好像污染了,有图请研友给分析分析-2
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细胞好像污染了,有图请研友给分析分析-3
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细胞好像污染了,有图请研友给分析分析-4
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细胞好像污染了,有图请研友给分析分析-5
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细胞好像污染了,有图请研友给分析分析-6
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

赶紧撇了

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-12-01 12:51:28
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幽阶一夜苔生

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-12-01 12:51:28
赶紧撇了

出现这种情况的时间很短,就在最后一次消化后就这样了,以前消化传代都没这样过?这应该是细菌污染吧?
3楼2014-12-01 13:10:50
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 幽阶一夜苔生 at 2014-12-01 13:10:50
出现这种情况的时间很短,就在最后一次消化后就这样了,以前消化传代都没这样过?这应该是细菌污染吧?...



[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-12-01 13:17:39
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幽阶一夜苔生

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-12-01 13:17:39

...

好吧,我的这个细胞养了1年了,还是没挺过来啊~
5楼2014-12-01 13:21:40
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dyh1978

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是污染了,最后一次消化之后的细胞要全部扔掉;最后一次消化前的细胞先复苏一瓶观察,如果没有污染,立即扩增数量、冻存保种。消化用的酶、培养液用无菌水重新配制,血清重新过滤。以后的操作注意对无菌环境的要求要更加严格,祝实验顺利
6楼2014-12-01 14:32:08
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myyounger

至尊木虫 (文坛精英)

路过顺便顶一下 祝楼主一切顺利!
7楼2014-12-01 20:12:04
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米兰红黑魂

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这个情况,首先不知道是不是养的肿瘤细胞,如果是有以下几种可能,1:不是污染,高倍镜下,只看到黑色点点状东西,看不到细胞,而且培养基偏碱,说明没有细胞生长,极有可能是消化过度,造成细胞破碎,黑点是细胞碎片。2:如果想确定是不是细菌污染,那肯定不是普通的细菌污染,因为培养基没变酸,而是变碱了,可能是产碱型细菌或者其他生物,支原体之类的,镜下观察这个黑点会不会增多,运动会不会受到抑制,简单一点的做法,取一滴置于96孔板,观察黑点的运动,然后加上一滴DMSO,看看黑点是不是还在动。也可以配点养细菌的固体培养基,直接取细胞培养基滴到固体培养基上,看看48h后能不能长菌。如果长菌,更好,鉴定一下,做个药敏,选几个敏感的抗生素,杀一杀,也许你的细胞还能救过来。如果你的真的是肿瘤细胞,就直接把细胞悬液,浓缩一下,浓度越高越好,找只尽可能是同品系的小鼠,打个背部瘤,长好后,把瘤取下,碾碎继续培养细胞就好了。
人生如棋,我愿为卒,即便走的在慢,在艰难,你何曾看见我后退一步!!!
8楼2014-12-01 23:30:36
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myyounger

至尊木虫 (文坛精英)

路过顺便顶一下 祝楼主一切顺利!
9楼2014-12-03 18:41:59
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