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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 基础 » 细胞好像污染了，有图请研友给分析分析
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幽阶一夜苔生

新虫 (小有名气)

[求助] 细胞好像污染了，有图请研友给分析分析 已有2人参与

培养的癌细胞好像污染了，变浑浊，显微镜下看到密度很大的细沙状物质，请大家看看是不是细菌污染啊，另外还有玻片图和培养液的外观图。。谢谢了~

细胞好像污染了，有图请研友给分析分析
IMG_20141201_105111.jpg


细胞好像污染了，有图请研友给分析分析-1
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细胞好像污染了，有图请研友给分析分析-2
拍摄 40X 2colo205.jpg


细胞好像污染了，有图请研友给分析分析-3
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细胞好像污染了，有图请研友给分析分析-4
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细胞好像污染了，有图请研友给分析分析-5
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细胞好像污染了，有图请研友给分析分析-6
IMG_20141201_102208.jpg
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1楼 2014-12-01 12:47:52
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
赶紧撇了

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-12-01 12:51:28
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幽阶一夜苔生

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-12-01 12:51:28
赶紧撇了

出现这种情况的时间很短，就在最后一次消化后就这样了，以前消化传代都没这样过？这应该是细菌污染吧？
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3楼2014-12-01 13:10:50
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 幽阶一夜苔生 at 2014-12-01 13:10:50
出现这种情况的时间很短，就在最后一次消化后就这样了，以前消化传代都没这样过？这应该是细菌污染吧？...

嗯

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-12-01 13:17:39
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幽阶一夜苔生

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuguiyan at 2014-12-01 13:17:39
嗯
...

好吧，我的这个细胞养了1年了，还是没挺过来啊~
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5楼2014-12-01 13:21:40
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dyh1978

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是污染了，最后一次消化之后的细胞要全部扔掉；最后一次消化前的细胞先复苏一瓶观察，如果没有污染，立即扩增数量、冻存保种。消化用的酶、培养液用无菌水重新配制，血清重新过滤。以后的操作注意对无菌环境的要求要更加严格，祝实验顺利
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6楼2014-12-01 14:32:08
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myyounger

至尊木虫 (文坛精英)
路过顺便顶一下 祝楼主一切顺利！
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7楼2014-12-01 20:12:04
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米兰红黑魂

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个情况，首先不知道是不是养的肿瘤细胞，如果是有以下几种可能，1：不是污染，高倍镜下，只看到黑色点点状东西，看不到细胞，而且培养基偏碱，说明没有细胞生长，极有可能是消化过度，造成细胞破碎，黑点是细胞碎片。2：如果想确定是不是细菌污染，那肯定不是普通的细菌污染，因为培养基没变酸，而是变碱了，可能是产碱型细菌或者其他生物，支原体之类的，镜下观察这个黑点会不会增多，运动会不会受到抑制，简单一点的做法，取一滴置于96孔板，观察黑点的运动，然后加上一滴DMSO，看看黑点是不是还在动。也可以配点养细菌的固体培养基，直接取细胞培养基滴到固体培养基上，看看48h后能不能长菌。如果长菌，更好，鉴定一下，做个药敏，选几个敏感的抗生素，杀一杀，也许你的细胞还能救过来。如果你的真的是肿瘤细胞，就直接把细胞悬液，浓缩一下，浓度越高越好，找只尽可能是同品系的小鼠，打个背部瘤，长好后，把瘤取下，碾碎继续培养细胞就好了。
赞一下(1人) 回复此楼
人生如棋，我愿为卒，即便走的在慢，在艰难，你何曾看见我后退一步！！！
8楼2014-12-01 23:30:36
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myyounger

至尊木虫 (文坛精英)
路过顺便顶一下 祝楼主一切顺利！
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9楼2014-12-03 18:41:59
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