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rockstonebob

银虫 (初入文坛)

BioEPI: 1
应助: 2 (幼儿园)
金币: 439.6
红花: 2
帖子: 31
在线: 19.5小时
虫号: 1569240
注册: 2012-01-08
性别: GG
专业: 细胞增殖、生长与分化

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小雨莎莎: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2013-08-13 22:38:52
silicare: 金币+6, BioEPI+1, 谢谢参与 2013-08-21 17:52:48

个人认为有可能的原因如下：
第一：细胞培养的时间很重要，也很难掌握，这个就看你自己对所培养细胞生长特性的了解程度了。长得久了穿出来的会太多，长的时间少了，穿出来会太少。像你这种情况有可能属于上述第二种，而且你找到了下室有细胞，不一定就代表穿出来了，因为如果穿出来太少，自然有可能脱落。我个人认为，掌握好细胞在小室中的培养时间长度是实验成功与否最关键的影响因素。为了这步能成功，建议铺细胞的时候多铺几个孔，然后培养相同长度的时间，只要你铺的孔够多，总会有那么几个孔在预计的时间内穿出令你满意的细胞术（当然，这样做是建立在经济基础上的），预实验也可以这样摸条件。
第二、建议取出小室后先4%多聚甲醛固定（可固定10-15分钟），然后再染色（0.5%的结晶紫15分钟为宜），最后再用棉签擦。先用极小流量的自来水冲洗小室柱子外侧，切记不要冲到小室底部，但是得冲过柱子侧面的水流过底面，后用棉签擦内室面，晾干、拍照。
第三、小室铺细胞的时候一定要均匀。要不然肯定是没细胞可穿了，大家都会集中在最中间，穿过去的也会脱落。