| 查看: 1732 | 回复: 9 | ||
[求助]
大鼠肠内菌孵育实验
|
|
小妹做的是大鼠肠内菌代谢研究实验，有好多问题不解，请教各位虫友： 1：查阅大量文献，方法主要分为两类，一是用厌氧稀释液直接与大鼠粪便孵育，一是粪便用厌氧稀释液稀释好后，再用厌氧培养基（GAM）培养基培养，但用到这种方法大多都是孵育人粪便的，不知道在做大鼠粪便孵育需不需要用到GAM培养基，如果可直接用厌氧稀释液孵育，以下方法可否： 大鼠新鲜粪便与生理盐水按比例1g:4ml混合制成悬浊液，2000r•min，离心 10min后得上清液，即为肠道菌液。取10ml肠道菌液加入到90ml厌氧培养液中，混匀后得肠菌培养液。取上述菌液各6ml，分别加药物xxmg（应为多少mg是不是也要摸索还是说有差不多的条件），混匀溶解，再将混匀的溶液分装 (0.5ml/管)，于37℃厌氧条件下培养O、1、2、4、6、8、10、16、24、36、48h，加甲醇 0.5ml终止反应，漩涡振荡 2min，1000Or•min，离心 10nin，取上清液进lc—ms。同时做空白实验。 2：在配置厌氧稀释液的时候出现了白色沉淀，我是按照下列方法配置的 溶液A：0.78% K2HPO4。 溶液B：0.47% KH2PO4 1.18%NaCl 1.2%(NH4)2SO4 0.12%CaCl2 0.45%MgSO4•7H2O。 溶液C：8.0%Na2CO3。 厌氧稀释液：A37.5ml+B37.5ml+C50ml +0. 5g半胱氨酸，2ml 25% L -抗坏血酸，1g牛肉膏，1g蛋白胨，1g营养琼脂，双蒸水定容至1L，用1mol/L的盐酸调至PH至7.5~8.0。 配了好几次了，试剂没有过期的，质量也都是按照以上严格来称量的，但就是再加C液碳酸钠的时候出现了絮状沉淀，怀疑是碳酸钙沉淀，高温高压灭菌后依然存在，这是怎么回事呢？难道与加入顺序有关？如能回答小妹不胜感激，金币奉送啊！ |
回复此楼» 猜你喜欢
（调剂）一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生
已经有4人回复
-
085602调剂 初试总分335
已经有8人回复
-
材料求调剂
已经有8人回复
-
求调剂
已经有7人回复
-
277求调剂
已经有6人回复
-
求调剂
已经有5人回复
-
一志愿 江南大学 085602 化工专硕 338分求调剂
已经有10人回复
-
283求调剂
已经有6人回复
-
一志愿郑州大学085600求调剂
已经有8人回复
-
285求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 制备肝匀浆需要在无菌环境下吗
已经有20人回复
- 新人研究生做实验怎么做？
已经有15人回复
- 多种细胞的培养方法
已经有53人回复
- 请教关于MTT脾淋巴细胞增殖问题
已经有11人回复
- 有无必要制备动物血清进一步做细胞试验？
已经有11人回复
- 外翻肠囊法 求助
已经有7人回复
- 【求助/交流】请问哪位大侠知道Neutral Comet Assay是什么试验？
已经有4人回复
- 【求助】大鼠肠吸收动力学实验
已经有14人回复
- 【求助】求教肝微粒体体外代谢实验问题
已经有20人回复
sgk555
木虫 (正式写手)
- 应助: 25 (小学生)
- 金币: 2185.7
- 散金: 105
- 红花: 4
- 帖子: 610
- 在线: 104.2小时
- 虫号: 998204
- 注册: 2010-04-16
- 专业: 药剂学
2楼2013-08-11 10:21:12
3楼2013-08-11 11:25:16
4楼2013-08-11 20:39:04
5楼2013-08-16 20:41:40
6楼2013-08-18 22:58:48
7楼2013-08-23 14:26:20
8楼2013-08-23 14:28:58
9楼2013-08-24 22:59:58
yaodonggui
金虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 478.7
- 红花: 1
- 帖子: 964
- 在线: 134.2小时
- 虫号: 2116967
- 注册: 2012-11-09
- 性别: MM
- 专业: 天然药物化学
10楼2014-09-22 15:31:40
