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shiluo

铁虫 (小有名气)

[求助] 外翻肠囊法 求助

哪位大侠能不能给个 大鼠做外翻肠囊法试验操作的注意事项,所需的动物的数量等的安排,最关键的是具体操作的视频, 不会做啊。。。 感激不尽。。。
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jonathonswq

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-06-18 21:20:10
shiluo(金币+4): 谢谢 2011-06-19 14:32:43
注意事项
1,使用混合了混合氧气的krebs-ringe 缓冲液,确保离体肠段的活性。
2,练习一下翻肠子,一般来讲一两只大鼠的训练量足够了。
3,肠道的肠道最好都是一样长的。
其他应该没有什么了。
面对滇池,背靠西山,听龙门风雨,看海梗海鸥飞翔。
2楼2011-06-18 21:13:42
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zhikunzhikun

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

shiluo(金币+1): 谢谢 2011-06-19 14:32:48
查查文献自己摸索一下吧,熟练工
自信阔达成就梦想
3楼2011-06-18 23:52:29
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小磊梦梦

银虫 (初入文坛)


karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-06-19 19:10:48
肠道最好尽量长度一样,平行试验尽量避免用的肠断差距太大(不同肠断的粗细、粘膜多少并不一样),最后最好折算一下。
可能固定不好固定,而且就算通入氧气,其肠道细胞活性也有一定的时间,为了尽量快,你还是想好怎样固定肠断为好,不然翻肠,固定要用时间也不短,尤其你以前没做过。
还有你最好提前练习一下取样,因为肠道比较细比较软,若用注射器取样可能比较容易吸扁肠道
适时归零……
4楼2011-06-19 16:18:49
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shiluo

铁虫 (小有名气)

送鲜花一朵
谢谢您,还有两个问题想请教,外翻肠囊试验的时候,就是把肠囊泡在药液里面,然后取囊内的液体测定药物浓度,浓度越高就是吸收了越多是吗,但是一个问题是,我要考察的制剂是脂质的,也就是不溶于水的,该怎么把肠囊和含药的制剂一起孵育?
第二个问题是,因为囊内的营养液是水溶液,但我的药物是难溶于水的,也是直接取囊内液测定吗?  那个药物不会因为不溶解而粘在壁上呢? 但是也不能加那些SDS什么的,有细胞毒性会影响肠子的功能吧
5楼2011-06-19 19:57:21
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jonathonswq

木虫 (正式写手)


jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-06-21 10:56:05
第一个问题,肠囊还是应该浸没在含药物制剂的krebs-ringe 缓冲液中,而此时肠囊内可以测得的药物应该是游离的药物,这才是吸收的。
第二,在制剂肠囊吸收的同时,你还需要进行原料药的肠囊吸收。感觉单独做制剂的吸收意义不是很大,原料药的对照也会减少肠壁吸附的影响,或者你需要对肠壁吸附作为肠囊吸收的一个补充,再做一下吸附实验。
面对滇池,背靠西山,听龙门风雨,看海梗海鸥飞翔。
6楼2011-06-21 09:42:36
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shiluo

铁虫 (小有名气)

谢谢,但我的制剂不溶于水,是脂质,请问要怎么分散到K-R溶液中? 接受液里能不能加SDS?
7楼2011-06-21 09:48:55
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xuwenkai

木虫 (正式写手)

木木木木木虫

引用回帖:
6楼: Originally posted by jonathonswq at 2011-06-21 09:42:36
第一个问题,肠囊还是应该浸没在含药物制剂的krebs-ringe 缓冲液中,而此时肠囊内可以测得的药物应该是游离的药物,这才是吸收的。
第二,在制剂肠囊吸收的同时,你还需要进行原料药的肠囊吸收。感觉单独做制剂的吸 ...

我也在做,请问每次取把肠囊里的全部液体取出来吗?还是取少量再回补缓冲液呢?
博学 审问 慎思 明辨 笃行
8楼2014-07-20 10:41:53
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