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changyi_23

金虫 (小有名气)

[求助] 5kD蛋白与35kD蛋白分离

我有2种蛋白,分子量一个是5KD,等电点为4.2;一个为35KD,等电点为6.5,总的蛋白体积较大。请问有什么办法能够经济有效得,将这2种蛋白分开呢?求指点~
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-08-09 20:24:58
阴离子交换柱层析,因为等电点差很远,而且填料可以买很普通的。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2013-08-08 19:18:24
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changyi_23

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-08-08 19:18:24
阴离子交换柱层析,因为等电点差很远,而且填料可以买很普通的。

等电点差1, 还算差很多哦??把ph调到8,可以吗?
3楼2013-08-08 20:31:28
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xiaojane

新虫 (正式写手)

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我觉得分子量差距很大,可以尝试用SDS-PAGE
4楼2013-08-08 21:54:16
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reallpf

木虫 (正式写手)

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laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励新虫应助! 2013-08-09 20:25:53
应该利用层析柱,具体的懂不太多,但是为了高效的分离层析肯定是最好的。2楼的建议应该参考。另外等电点都相差2.3了还不大么?
5楼2013-08-09 00:05:08
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风影一生

新虫 (正式写手)

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changyi_23: 金币+1 2013-08-09 23:18:23
分子量差这么多,显然用分子筛啊
6楼2013-08-09 09:04:27
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phoenix211

金虫 (小有名气)

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changyi_23: 金币+3 2013-08-09 23:19:02
可以用阴离子交换层析  这个等电点还是有差距的
或者楼主试试超滤?用个10K的超滤管试试?
7楼2013-08-09 15:59:02
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zhangyt7638

木虫 (著名写手)

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★ ★
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changyi_23: 金币+2 2013-08-09 23:21:38
不管你是实验室的分离还是生产上的分离,个人感觉超滤比较好
8楼2013-08-09 16:16:35
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

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★ ★
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changyi_23: 金币+2 2013-08-09 23:21:27
使用20-30kD的浓缩管,上面是大的,流下来的是小的
我选择,我喜欢;我喜欢我的选择。
9楼2013-08-09 16:49:10
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changyi_23

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by phoenix211 at 2013-08-09 15:59:02
可以用阴离子交换层析  这个等电点还是有差距的
或者楼主试试超滤?用个10K的超滤管试试?

嗯 试了阴离子柱 只是实验室没有10K的超滤管
10楼2013-08-09 23:19:46
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