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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 5kD蛋白与35kD蛋白分离
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changyi_23

金虫 (小有名气)

[求助] 5kD蛋白与35kD蛋白分离

我有2种蛋白，分子量一个是5KD，等电点为4.2；一个为35KD，等电点为6.5，总的蛋白体积较大。请问有什么办法能够经济有效得，将这2种蛋白分开呢？求指点~
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1楼 2013-08-08 15:54:52
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2013-08-09 20:24:58
阴离子交换柱层析，因为等电点差很远，而且填料可以买很普通的。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2013-08-08 19:18:24
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changyi_23

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-08-08 19:18:24
阴离子交换柱层析，因为等电点差很远，而且填料可以买很普通的。

等电点差1， 还算差很多哦？？把ph调到8，可以吗？
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3楼2013-08-08 20:31:28
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xiaojane

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得分子量差距很大，可以尝试用SDS-PAGE
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4楼2013-08-08 21:54:16
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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励新虫应助！ 2013-08-09 20:25:53
应该利用层析柱，具体的懂不太多，但是为了高效的分离层析肯定是最好的。2楼的建议应该参考。另外等电点都相差2.3了还不大么？
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5楼2013-08-09 00:05:08
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风影一生

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
changyi_23: 金币+1 2013-08-09 23:18:23
分子量差这么多，显然用分子筛啊
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6楼2013-08-09 09:04:27
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phoenix211

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
changyi_23: 金币+3 2013-08-09 23:19:02
可以用阴离子交换层析  这个等电点还是有差距的
或者楼主试试超滤？用个10K的超滤管试试？
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7楼2013-08-09 15:59:02
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zhangyt7638

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
changyi_23: 金币+2 2013-08-09 23:21:38
不管你是实验室的分离还是生产上的分离，个人感觉超滤比较好
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8楼2013-08-09 16:16:35
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liuyuexinfei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
changyi_23: 金币+2 2013-08-09 23:21:27
使用20-30kD的浓缩管，上面是大的，流下来的是小的
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我选择，我喜欢；我喜欢我的选择。
9楼2013-08-09 16:49:10
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changyi_23

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by phoenix211 at 2013-08-09 15:59:02
可以用阴离子交换层析  这个等电点还是有差距的
或者楼主试试超滤？用个10K的超滤管试试？

嗯 试了阴离子柱 只是实验室没有10K的超滤管
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10楼2013-08-09 23:19:46
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