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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » BL21菌株进行甘油保存时，需要加入卡那霉素吗？如需，加入的浓度是多少？
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萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)

[求助] BL21菌株进行甘油保存时，需要加入卡那霉素吗？如需，加入的浓度是多少？

各位战友，求助，问题如标题所示，BL21菌株内含PET30a质粒，需要进行保存，用甘油保存的话，需要加入多少抗生素呢？烦请大家帮助一下！
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1楼 2013-08-05 17:03:30
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xuexie

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

摇菌活化菌的时候加抗生素是为了让有抗性的目的菌生长抑制杂菌生长。保菌时不加抗生素。800μ新鲜l菌液+200μl甘油（80%浓度）于1.5ml EP管，保存于-80℃或者-20℃冰箱。-20℃冰箱里最好两三个月活化一次再保菌。-80℃可以存放更久。
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12楼2013-08-12 16:31:05
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秋水素心

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
萌萌李萌萌: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-08-05 19:46:57
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-08-06 08:37:32
不需要再额外加抗生素的，我没加过，直接按比例将菌液加入灭菌好的甘油就好
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认真过好每一天！
2楼2013-08-05 19:35:44
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萌萌李萌萌

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 秋水素心 at 2013-08-05 19:35:44
不需要再额外加抗生素的，我没加过，直接按比例将菌液加入灭菌好的甘油就好

不加抗生素的话，不用担心质粒丢失吗？我看着小木虫里众说纷纭，请问你有没有具体的保存步骤或者参考文献？谢谢
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3楼2013-08-05 19:46:45
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秋水素心

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 萌萌李萌萌 at 2013-08-05 19:46:45
不加抗生素的话，不用担心质粒丢失吗？我看着小木虫里众说纷纭，请问你有没有具体的保存步骤或者参考文献？谢谢...

加入甘油后，直接-80度冻存
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认真过好每一天！
4楼2013-08-05 19:48:54
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