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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC梯度洗脱有杂峰
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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Mr泡面

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC梯度洗脱有杂峰

小弟在做中药复方的指纹图谱，用的是C18柱，流动相为乙腈：0.1%的磷酸缓冲盐。梯度为：0-23min（乙腈5-19%），23-33min（乙腈19-22%），33-48min（乙腈22-32%），48-60min（乙腈32-75%），60-61min（乙腈75-80%），61-66min（乙腈80%），66-78min（乙腈80-5%），78-80min（乙腈5%）。进标准品的时候发现，标准品中有好多的杂质峰，出现在各个时间段。单独进了溶剂和空白都有类似的杂峰出现。换了柱子之后还是会出现杂峰。柱子也都冲洗过了。请问下哪位知道有哪些原因造成这种情况。
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1楼 2013-08-05 11:26:40
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Tony_young

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
Mr泡面: 金币+2, ★有帮助, 那我明天试下换台液相试试，谢谢 2013-08-06 17:39:58
引用回帖:
12楼: Originally posted by Mr泡面 at 2013-08-06 10:23:02
谢谢你的建议，补充一下，我设定的波长是203nm。之前我已经把管道连同柱子冲过好几次，柱子也换过了。可以排除掉柱子的问题。进了甲醇、两种标准品都在差不多的位置出峰。而且都是在梯度变化较快的地方。已经做了很 ...

210以下甲醇跟乙腈都有吸收的～可能是这个原因～吸收池要是用久了脏了是很难冲干净的～我遇见过这种情况，打电话让工程师来清理的

[ 发自小木虫客户端 ]
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13楼2013-08-06 12:14:11
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suruiqin

版主 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Mr泡面: 金币+3, ★有帮助, 但是我进的是标准品，而且要做得是新药申报的资料，标准品中有杂质峰是不是说不过去？ 2013-08-05 14:24:17
个人觉得是梯度峰，我做实验时就出现梯度峰，但是如果不影响实验可以不用管它
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所有的成就都源于新的挑战
2楼2013-08-05 13:39:29
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suruiqin

版主 (知名作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by suruiqin at 2013-08-05 13:39:29
个人觉得是梯度峰，我做实验时就出现梯度峰，但是如果不影响实验可以不用管它

你附上空针的图，就可以说明了
赞一下(2人) 回复此楼
所有的成就都源于新的挑战
3楼2013-08-05 14:25:37
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jgy2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
梯度用有机相一定要用进口的，国产的不行

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-08-05 15:37:00
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