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Mr泡面

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[求助] HPLC梯度洗脱有杂峰

小弟在做中药复方的指纹图谱，用的是C18柱，流动相为乙腈：0.1%的磷酸缓冲盐。梯度为：0-23min（乙腈5-19%），23-33min（乙腈19-22%），33-48min（乙腈22-32%），48-60min（乙腈32-75%），60-61min（乙腈75-80%），61-66min（乙腈80%），66-78min（乙腈80-5%），78-80min（乙腈5%）。进标准品的时候发现，标准品中有好多的杂质峰，出现在各个时间段。单独进了溶剂和空白都有类似的杂峰出现。换了柱子之后还是会出现杂峰。柱子也都冲洗过了。请问下哪位知道有哪些原因造成这种情况。

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1楼 2013-08-05 11:26:40

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Mr泡面

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引用回帖:

11楼: Originally posted by Tony_young at 2013-08-05 22:59:37
我实验室的也是P680
第一，本来跑梯度多多少少都会有一点杂峰，只要不是很明显的话，影响不大，本来梯度基线都在飘，要是梯度大的话飘的更厉害。
第二，进一针纯甲醇，对比标准品溶液的图，看看杂峰的位置和大小， ...

谢谢你的建议，补充一下，我设定的波长是203nm。之前我已经把管道连同柱子冲过好几次，柱子也换过了。可以排除掉柱子的问题。进了甲醇、两种标准品都在差不多的位置出峰。而且都是在梯度变化较快的地方。已经做了很长一段时间还是有这些杂峰。请问有可能吸收池脏了之后一直冲不干净吗？