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phoeniya

新虫 (初入文坛)

[求助] 可以用BL21来扩增Lacz片段吗?

请问,为了获取LacZ的全长,可以用BL21来扩增吗?有什么需要注意的点?
谢谢。
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phoeniya

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yhbletter at 2013-07-31 09:08:09
可以的,我们实验室就是从这个菌里面P出来的,你只要做个菌落PCR就可以了
我们用的引物是
LacZ-F:TAAGGATCCGCCACCATGACCATGATTACGGATTCACTGG
LacZ-R:CCACCGCCCGGGTTATTTTTGACACCAGACCAACTGG
引物分别加了BamH ...

非常感谢。。。。
5楼2013-07-31 11:21:18
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-31 09:16:24
为什么
2楼2013-07-31 08:03:02
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phoeniya

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2013-07-31 08:03:02
可以,请参考
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/296142109?from=332766&to=335840&sat=4&sat_key=71980768

这是bl21里lacz的全长序列,如果用bl21菌先提前基因组然后设计引物进行pcr,应该可以p出lacz全长吧?
谢谢你~~~
3楼2013-07-31 08:36:50
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yhbletter

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助! 2013-07-31 09:16:03
phoeniya: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-07-31 12:24:52
可以的,我们实验室就是从这个菌里面P出来的,你只要做个菌落PCR就可以了
我们用的引物是
LacZ-F:TAAGGATCCGCCACCATGACCATGATTACGGATTCACTGG
LacZ-R:CCACCGCCCGGGTTATTTTTGACACCAGACCAACTGG
引物分别加了BamHI和XmaI的酶切位点,你可以参考这个引物设计自己的引物
4楼2013-07-31 09:08:09
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