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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 可以用BL21来扩增Lacz片段吗？
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phoeniya

新虫 (初入文坛)

[求助] 可以用BL21来扩增Lacz片段吗？

请问，为了获取LacZ的全长，可以用BL21来扩增吗？有什么需要注意的点？
谢谢。
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1楼 2013-07-30 17:20:16
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yhbletter

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖应助！ 2013-07-31 09:16:03
phoeniya: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2013-07-31 12:24:52
可以的，我们实验室就是从这个菌里面P出来的，你只要做个菌落PCR就可以了
我们用的引物是
LacZ-F：TAAGGATCCGCCACCATGACCATGATTACGGATTCACTGG
LacZ-R：CCACCGCCCGGGTTATTTTTGACACCAGACCAACTGG
引物分别加了BamHI和XmaI的酶切位点，你可以参考这个引物设计自己的引物
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4楼2013-07-31 09:08:09
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-31 09:16:24
可以，请参考
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nucc ... mp;sat_key=71980768
赞一下(1人) 回复此楼
为什么
2楼2013-07-31 08:03:02
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phoeniya

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 547star at 2013-07-31 08:03:02
可以，请参考
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/296142109?from=332766&to=335840&sat=4&sat_key=71980768

这是bl21里lacz的全长序列，如果用bl21菌先提前基因组然后设计引物进行pcr，应该可以p出lacz全长吧？
谢谢你~~~
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3楼2013-07-31 08:36:50
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phoeniya

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yhbletter at 2013-07-31 09:08:09
可以的，我们实验室就是从这个菌里面P出来的，你只要做个菌落PCR就可以了
我们用的引物是
LacZ-F：TAAGGATCCGCCACCATGACCATGATTACGGATTCACTGG
LacZ-R：CCACCGCCCGGGTTATTTTTGACACCAGACCAACTGG
引物分别加了BamH ...

非常感谢。。。。
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5楼2013-07-31 11:21:18
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