24小时热门版块排行榜    

查看: 1501  |  回复: 7

crazy墨汁

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因连pMA5质粒,转入JM109后,提完质粒跑胶验证,结果大小只有3000多,求原因

pMA5质粒,转入JM109后,提完质粒跑胶验证,结果大小只有3000多,求原因???
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

overhalfmoon

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-29 20:37:07
有的细菌有重组酶,会把载体整合到基因组去。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2013-07-29 20:10:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huanghznd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
crazy墨汁(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-30 10:14:05
crazy墨汁: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-07-30 15:35:57
质粒有超螺旋现象,真正的质粒大小最好用单酶切,质粒线性化后,才能确定其大小。最好以空载的线性化质粒为对照。
3楼2013-07-30 09:29:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crazy墨汁

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by huanghznd at 2013-07-30 09:29:39
质粒有超螺旋现象,真正的质粒大小最好用单酶切,质粒线性化后,才能确定其大小。最好以空载的线性化质粒为对照。

我把质粒单双酶切了,基因一千多也看到了,但是感觉质粒大小小了一点
4楼2013-07-30 15:37:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crazy墨汁

新虫 (初入文坛)

前面两个是MARKER,后面是我的单双酶切
基因连pMA5质粒,转入JM109后,提完质粒跑胶验证,结果大小只有3000多,求原因
UVP13620July292013.JPG

5楼2013-07-30 15:38:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huanghznd

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-30 20:37:11
引用回帖:
5楼: Originally posted by crazy墨汁 at 2013-07-30 15:38:48
前面两个是MARKER,后面是我的单双酶切

UVP13620July292013.JPG

如你所说,图中酶切后泳道中小的那个是你的目的条带1000多点。如果你的基因是从质粒的MCS位置插入的话,可以比较肯定的是空载质粒跟你插入的质粒是不同的。图中都没怎么跑开就有可以看出差别了,如果再跑长一点,差别应该还会再明显。建议LZ重新做吧。第二个Marker是DL2000吧?
6楼2013-07-30 16:09:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crazy墨汁

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by huanghznd at 2013-07-30 16:09:24
如你所说,图中酶切后泳道中小的那个是你的目的条带1000多点。如果你的基因是从质粒的MCS位置插入的话,可以比较肯定的是空载质粒跟你插入的质粒是不同的。图中都没怎么跑开就有可以看出差别了,如果再跑长一点,差 ...

恩,后来又跑了一会,确实质粒小了将近有两千大小,但是为什么会出现这种情况呢?
7楼2013-07-30 16:35:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xz2001199802

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-30 20:37:37
一,没跑开,时间应该更长些,二,你的markers选择不合适,所有很难说是小了, 三,换其他的酶切切,确定是否真的小了
越学越无知
8楼2013-07-30 17:40:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 crazy墨汁 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研化学学硕调剂,一志愿985 +3 张vvvv 2026-03-15 5/250 2026-03-16 20:25 by 张vvvv
[考研] 0703化学调剂,求各位老师收留 +8 秋有木北 2026-03-14 8/400 2026-03-16 15:21 by 哦哦123
[考研] 材料与化工专硕调剂 +3 heming3743 2026-03-16 3/150 2026-03-16 15:05 by peike
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[硕博家园] 深圳大学硕士招生(2026秋,传感器方向,仅录取第一志愿) +4 xujiaoszu 2026-03-11 8/400 2026-03-16 09:45 by xujiaoszu
[考研] 265求调剂 +4 威化饼07 2026-03-12 4/200 2026-03-14 17:23 by userper
[考研] 复试调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 环境调剂 +6 晓看天暮看云 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中农业大学071010,总分三百二,求调剂 +3 困困困困坤坤 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:35 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 289求调剂 +3 李政莹 2026-03-12 3/150 2026-03-13 11:02 by 求调剂zz
[考博] 福州大学杨黄浩课题组招收2026年专业学位博士研究生,2026.03.20截止 +3 Xiangyu_ou 2026-03-12 3/150 2026-03-13 09:36 by duanwu655
[考研] 0857环境调剂 +5 熠熠_11 2026-03-10 5/250 2026-03-11 10:59 by wang_dand
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀! 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
[考研] 0703化学调剂 +3 三dd. 2026-03-10 3/150 2026-03-10 15:45 by peike
[考研] 一志愿:武汉理工,材料工程,英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
信息提示
请填处理意见