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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提出的质粒跑胶为什么只在2500bp左右，本来应是是5000多bp的？
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新虫 (初入文坛)

[求助] 提出的质粒跑胶为什么只在2500bp左右，本来应是是5000多bp的？

同上 。是没提好？还是其他的原因？
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1楼 2012-12-24 10:35:17
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
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小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-24 19:12:14
提得好的质粒应该绝大部分是超螺旋的，跑得比marker的线性条带快。如果你5K的质粒真跑到5K的位置，才是没提好呢。想确定质粒的分子量最简单的办法是用单酶切成线性分子，再和marker比较。
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3楼2012-12-24 16:54:14
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tigertang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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没有被注册: 金币+2 2012-12-27 13:40:18
建议上图。质粒提取直接跑胶可能包括不同形式的质粒（超螺旋或线性等），想超螺旋跑的较线性要快，建议找个单个酶切位点的酶切了再跑胶鉴别。
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2楼2012-12-24 12:00:03
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desheng101

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒大多数是超螺旋的，和Maker相比，基本没有可比性。你做个单酶切跑胶看一下，再来比对。
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4楼2012-12-24 17:16:25
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gzl1988

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主的情况很正常，   单切，跑电泳     试一下
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OhGod
5楼2012-12-24 17:21:30
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匿名

用户注销 (小有名气)
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6楼2012-12-25 08:40:38
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新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by tigertang at 2012-12-24 12:00:03
建议上图。质粒提取直接跑胶可能包括不同形式的质粒（超螺旋或线性等），想超螺旋跑的较线性要快，建议找个单个酶切位点的酶切了再跑胶鉴别。

这样的结果是不是不太好 ？

连接后质粒3.jpg
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7楼2012-12-25 14:06:45
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

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给个图解吧，不然看不太懂你这个图
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Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
8楼2012-12-25 14:18:56
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新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Marado at 2012-12-25 14:18:56
给个图解吧，不然看不太懂你这个图

marker 左右是跑的不一样的重组质粒
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9楼2012-12-25 16:19:01
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Bella0224

金虫 (小有名气)
提取质粒大部分是超螺旋，所以位置不对很正常的，建议酶切或者后续检测
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10楼2013-07-08 09:38:56
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