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没有被注册

新虫 (初入文坛)

[求助] 提出的质粒跑胶为什么只在2500bp左右,本来应是是5000多bp的?

同上 。是没提好?还是其他的原因?
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-24 19:12:14
提得好的质粒应该绝大部分是超螺旋的,跑得比marker的线性条带快。如果你5K的质粒真跑到5K的位置,才是没提好呢。想确定质粒的分子量最简单的办法是用单酶切成线性分子,再和marker比较。
3楼2012-12-24 16:54:14
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普通回帖

tigertang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
没有被注册: 金币+2 2012-12-27 13:40:18
建议上图。质粒提取直接跑胶可能包括不同形式的质粒(超螺旋或线性等),想超螺旋跑的较线性要快,建议找个单个酶切位点的酶切了再跑胶鉴别。
2楼2012-12-24 12:00:03
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desheng101

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒大多数是超螺旋的,和Maker相比,基本没有可比性。你做个单酶切跑胶看一下,再来比对。
4楼2012-12-24 17:16:25
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gzl1988

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主的情况很正常,   单切,跑电泳     试一下
OhGod
5楼2012-12-24 17:21:30
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匿名

用户注销 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖仅楼主可见
6楼2012-12-25 08:40:38
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新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by tigertang at 2012-12-24 12:00:03
建议上图。质粒提取直接跑胶可能包括不同形式的质粒(超螺旋或线性等),想超螺旋跑的较线性要快,建议找个单个酶切位点的酶切了再跑胶鉴别。

这样的结果是不是不太好 ?

连接后质粒3.jpg

7楼2012-12-25 14:06:45
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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
给个图解吧,不然看不太懂你这个图
Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?
8楼2012-12-25 14:18:56
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没有被注册

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by Marado at 2012-12-25 14:18:56
给个图解吧,不然看不太懂你这个图

marker 左右是跑的不一样的重组质粒
9楼2012-12-25 16:19:01
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Bella0224

金虫 (小有名气)

提取质粒大部分是超螺旋,所以位置不对很正常的,建议酶切或者后续检测
10楼2013-07-08 09:38:56
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