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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 紫外分光光度计 光密度值
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1楼 2013-07-29 17:13:35
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Tony_young

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
根据Beer-Lamb吸收定理:一束单色平行光透过某种分布均匀的物质,光能被吸收,光能吸收量等于物质的克分子量;物质对光吸收的多少与照射光强度无关。光密度OD
=Lg(1/T),平均透射率T=Greyi/Greyo×100%,Greyi为被测对像的平均灰度值(出射光强度,即透射光强
度),Greyo为空白区域的平均灰度值(入射光强度,即本底光或光源的强度)。设定图像分析系统光密度值和灰度值之间的转换关系称光密度定标。例如八比特(Bit)图像为256级灰度:空白本底的OD空=LgGreyo/Greyi=Lg200/200=
Lg1=0,全黑图像的OD黑=LgGreyo/Greyi=Lg255/0
→∞,理论上光密度值是(0<OD<∞)大于零小于无穷大的。实际上,假设出射光强度比入射光强度低100倍OD=
Lg255/2.55=Lg100=2,出射光强度比入射光强度低10
倍OD=Lg255/25.5=lg10=1,所以多数情况下光密度值为0<OD<1的数。定标时设空白本底的光密度值
OD=0,全黑图像的光密度值OD=2,计算机自动得出OD-Grey曲线,并按此关系进行灰度值和光密度值的转换,计
算出光密度值。
从另一个角度看,平均透射率反映物体的透光性,亮意味着透光多,暗意味着透光少,光被吸收的多。T=10-kcd式中k为克分子吸收系数,c为物质的浓度,d为物质的厚度
(光程),光密度值OD=lg1/T=10kcd=kcd,可见光
密度OD与物质的浓度C成正比,光密度值的大小代表染色的深浅,反映物质的相对浓度
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2楼2013-07-30 11:34:10
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Tony_young

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by Tony_young at 2013-07-30 11:34:10
根据Beer-Lamb吸收定理:一束单色平行光透过某种分布均匀的物质,光能被吸收,光能吸收量等于物质的克分子量;物质对光吸收的多少与照射光强度无关。光密度OD
=Lg(1/T),平均透射率T=Greyi/Greyo×100%,Greyi为被测对像 ...

参考文献
光密度值测定在实验医学研究中的应用及意义
解剖科学进展 ProgressofAnatomicalSciences 2006,12(3):286
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3楼2013-07-30 11:35:15
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Tony_young

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

参考文献   光密度值测定在实验医学研究中的应用及意义

解剖科学进展 Progress of Anatomical Sciences 2006,12(3):286
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4楼2013-07-30 11:36:22
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qyf8833

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Tony_young at 2013-07-30 11:34:10
根据Beer-Lamb吸收定理:一束单色平行光透过某种分布均匀的物质,光能被吸收,光能吸收量等于物质的克分子量;物质对光吸收的多少与照射光强度无关。光密度OD
=Lg(1/T),平均透射率T=Greyi/Greyo×100%,Greyi为被测对像 ...

真牛，学习了，以后多和楼主交流学习
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5楼2013-08-02 07:59:10
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